طراحی و مهندسی ساختار پلی سیترونیک قطعه F(ab`)2 آنتی بادی ضدگیرنده HER2 جهت بیان در میزبان باکتریایی

در سال های اخیر، آنتی بادی های منوکلونال نوترکیب و مشتقات آنها به عنوان یکی از مهم ترین عوامل هدف درمانی در نظر گرفته شده اند. آنتی بادی های منوکلونال به صورت رایج در میزبان پستانداران تولید می شوند که هزینه های تولید در این میزبان بسیار بالاست و در نتیجه قیمت داروهای این گروه درمانی مهم بالا بوده که به مصرف کنندگان این داروها هزینه بالایی تحمیل می شود. به این منظور انتخاب یک سیستم تولیدی ارزان و راحت مثل میزبان های باکتریایی برای کاهش هزینه تولید این محصولات به عنوان یک سرفصل بزرگ برای موضوعات در حال رشد در سیستم های بیان مواد نوترکیب به شمار می رود.
در این مطالعه، یک ساختار پلی سیترونی از قطعه F(ab`) 2 از آنتی HER2 که قادر به بیان درد در سیستم باکتریایی باشد طراحی شد. همچنین در ساختار ناحیه لولای آنتی بادی تغییراتی داده شد تا این قطعه به شکل صحیح بیان شده و تابخورد و از تشکیل انواع مختلفی از ساختارهای هتروژنو غیرفعال جلوگیری شود. نهایتا ساختار ژنی سنتز شده در حامل باکتریایی، بدون استفاده از روش های معمول کلون سازی و به صورت مستقیم وارد شد.
ساختار پلی سیترونیک قطعه F(ab`)2 آنتی بادی ضدگیرنده HER-2 به خوبی طراحی شد. تمامی اجزای لازم جهت رونویسی، ترجمه، تاخوردگی مناسب، شناسایی و خالص سازی در نظر گرفته شد. اصلاحات ناحیه لولا جهت به طور موفقیت آمیزی انجام گرفت. کاستژنی F(ab`)2 با پرایمرهای اختصاصی تکثیر شد. کاست بیان شونده حاصل با موفقیت در داخل حامل پلاسمیدی PET-32 EK/LIC و در جایگاه LIC اضافه شد.
نتایج این مطالعه نشان می دهد که قطعه F(ab`)2 اصلاح شده با استفاده از روش کلون سازی غیروابسته به اتصال به طور موفقیت آمیزی وارد حامل بیانی E.coli شد. اگرچه مطالعات انجام شده در زمینه طراحی و تولید قطعه F(ab`)2 بسیار محدود است، نتایج این تحقیق نشان می دهد که میزبان های باکتریایی مسیرهای جایگزین مناسب و سیستم بیانی مقرون به صرفه از نظر اقتصادی برای تولید قطعات آنتی بادی هستند.