بررسی فعالیت آنزیم آلکالین فسفاتاز در فراکسیون های جدا شده از زهر افعی لبتینای ایران

زهر مارها، کمپلکس پیچیده ای از اجزای مختلف از جمله پروتئین ها و پپتیدها بوده که اکثر آن ها دارای خواص آنزیمی می باشند. در این بررسی به مطالعه ی وجود آنزیم آلکالین فسفاتاز (ALP) در زهر و فراکسیون های افعی لبتینای ایران، روی سفادکس 100-G، به منظور بررسی مناسب بودن این روش برای جداسازی آنزیم مذکور پرداخته شد.
100 میلی گرم از زهر خام افعی لبتینای ایران با استفاده از کروماتوگرافی ژل فیلتراسیون روی سفادکس 100-G که با استفاده از بافر استات آمونیوم 20 میلی مولار (6/4 = pH) به تعادل رسیده بود، به 6 فراکسیون تقسیم شد. فعالیت آنزیم ALP با استفاده از روش سالکوفسکی و همکاران و با استفاده ازسوبسترای پارا نیترو فنیل فسفات اندازه گیری شد.
91 میلی گرم (حدود 79%) از زهر خام افعی لبتینای ایران، پروتئین بود. زهر خام به 6 فراکسیون مجزا تقسیم شد که به ترتیب سرعت خارج شدن از ستون، Peak I (PI) تا Peak VI (PVI) نامگذاری شدند. فعالیت مخصوص آنزیم ALP در زهر خام و PI به ترتیب 4-10 × 4 و3-10 × 1 واحد در میلی گرم به دست آمد. سایر پیک ها هیچ گونه فعالیتی از این آنزیم را از خود نشان ندادند.
نتایج حاصل از این بررسی نشان داد که زهر افعی لبتینای ایران دارای فعالیت آنزیم ALP بوده و PI نیز کل این فعالیت را به خود اختصاص داده است. سایر پیک های حاصل، فاقد هر گونه فعالیتی از آنزیم ALP بودند.