مقایسه روش های مختلف ردیابی قارچ Rosellinia necatrix در خاک

برای دستیابی به روش ساده و حساس جهت ردیابی قارچ Rosellenia necatrix عامل پوسیدگی رزلینیایی ریشه در خاک و ریشه، مقایسه ای بین روش های کشت مستقیم خاک و ریشه آلوده در محیط کشت های، MEAR MEAR+ پنکونازول و MEAS، تکنیک Nested PCR و تله گذاری صورت گرفت. استخراج مستقیم DNA از خاک و ریشه ها انجام شد و ردیابی بیمارگر با استفاده ازآغازگرهای اختصاصیR2، R8 و R7، R10 در Nested PCR انجام شد. به منظور بررسی رابطه بین میزان مایه زنی اولیه و زمان لازم بعد از مایه زنی بیمارگر برای ردیابی و بروز علائم بیماری، آزمایشی در دو تکرار انجام شد، تکرار اول مقدار 2، 4، 8، 16، 32 گرم بذر گندم آلوده به عنوان زاد مایه اولیه به خاک اضافه و سپس گیاه باقلا به عنوان گیاه آزمون کشت شد. نمونه برداری در یک ماه و هر هفت روز یک بار انجام شد. درتکرار دوم مقدار مایه زنی 25/0، 5/0، 1، 2، 4، 8، 16، 32 گرم بذر گندم آلوده و زمان های نمونه برداری 0، 2، 4، 8، 16، 32، 64 و 128 روز تغییر یافت. نتایج نشان داد با افزایش مایه تلقیح، زمان لازم جهت ردیابی و بروز علائم بیماری کاهش می یابد، هم چنین مشخص گردید بیمارگر قبل از این که روی میزبان ایجاد بیماری کند به وسیله Nested PCR قابل ردیابی است. روش Nested PCR از سایر روش های به کار برده شده مناسب تر و سریع تر تشخیص داده شد.