اثر مهار بیان ژن EFG1 برکاهش بیان ژن ALS3 در مخمر Candida albicans توسط تکنولوژیRNAi

مهمترین فاکتور ویرولانس Candida albicansکه نقش مهم کلیدی در پاتوژنز این مخمر دارد، توانایی آن در تغییر و تبدیل فرم مخمری به فرم هایفی می باشد. پروتئین Efg1 مهمترین فاکتور رونویسی القاء کننده رشد هایفی در این مخمر شناخته شده است که مسئول بیان ژنهای اختصاصی رشد هایفی تحت شرایط متنوعیمی باشد. ژن ALS3 یکی ز ژنهایی است که بیان آن بستگی به بیان ژن EFG1 داشته و یک پروتئین چسبنده را کد می کند. این پروتئین قابلیت اتصال به طیف وسیعی از سوبسترا را دارد. در بین مطالعه، بیان ژن EFG1 با استفاده از siRNA سنتتیک درCandidaalbicans کاهش یافته و اثر بین کاهشبیان بر روی بیان ژن ALS3 بررسی شده است. siRNA19نوکلئوتیدی اختصاصی ژن EFG1 بر اساس سکانس cDNA ژن EFG1در Candidaalbicans طراحی و سنتز شد. برای ورود siRNA به درون سلول از متد تغییر یافته PEG/LiAc استفاده شد. برای اندازه گیری کمی میزان بیان ژن EFG1 و ژن وابسته به بیان آن،ALS3، از تکنیک Real-Time PCR استفاده گردید. تصاویر گرفته شده با میکروسکوپ فلورسنت بیانگر ورود موفق siRNA به سلول مخمری می باشد. بر اساس نتایج به دست آمده، بیان ژن EFG1 در حضور 500 nM و 1000nM از siRNA اختصاصی ژن EFG1 به طور چشمگیری کاهش یافت. همچنین در هر دو غلظت یاد شده از siRNA اختصاصی ژن EFG1، کاهش بیان ژن ALS3به طور قابل توجهی مشاهده شد. در این مطالعه از تکنیک RNA interference در کاهش بیان ژن EFG1و متعاقبا کاهش بیان ژن ALS3، با موفقیتاستفاده گردید. از این یافته می توان به عنوان راهکاری نوین در جهت طراحی عوامل ضد قارچی جدید و مواجهه با کاندیدیازیس استفاده نمود.