پروتکل چند مرحله ای جدید در تمایز سلولهای استرومایی مغز استخوان به نورونهای شبه گاباارژیک

سلولهای بنیادین مغز استخوان به عنوان منبع مناسبی از سلولهای چند ظرفیتی میباشند که در مطالعت، جهت سلول درمانی استفاده می شوند. سلولهای استرومایی مغز استخوان در شرایط مناسب توانایی تبدیل شدن به سلولهای عصبی را دارند. در این تحقیق اثرالقایی همزمان رتینوییک اسید و کریاتین بر روی افزایش تمایز سلولهای بنیادین مغز استخوان به سلولهای شبه گاباارژیکی بررسی شد.

سلولهای استرومایی مغز استخوان از استخوانهای فمور و تیبیا رات جدا شده، در محیط کشت DMEM/F12 و10% FBS قرار داده شد.در مرحله پیش القا سلولها در بتامرکاپتواتانل قرار داده شدند و سپس القا بوسیله کریاتین و رتینوییک اسید صورت گرفت. برای بررسی تمایز سلولهای استرومایی مغز استخوان به سلولهای شبه گاباارژیکی از روش ایمنوسیتوشیمی با آنتی بادی های علیه neurofilament 160، 200 kDa، nestin، fibronectin،، AD 65/67 و GABA استفاده گردید. درصد سلولهای با واکنش ایمنی مثبت برای بررسی میزان تمایز محاسبه گردید. از واکنش زنجیره ای پلیمراز برای بررسی بیان ژنهای f ibronectin، Oct-4، GAD 65/67، vesicular GABA transporter و تمایز سلولهای استرومایی مغز استخوان به سلولهای شبه گاباارژیکی استفاده گردید.

نتایج بیانگر افزایش دو برابری در تمایز سلولهای بنیادین مغز استخوان به سلولهای شبه گاباارژیکی با روش القای توام بوسیله کریاتین و رتینوییک اسید، نسبت به القا صورت گرفته فقط با کریاتین است که در القا توام حدود 71.6 درصد سلول شبه گاباارژیکی ایجاد گردید. پس از القا Oct-4، fibronectin بیان نگردید. چ

نتایج نشان داد که استفاده از مواد بتامرکاپتواتانل، رتینوییک اسید و کریاتین سبب تمایز سلولهای استرومایی مغز استخوان به شبه گاباارژیکی می شود.