آزمون مکمل سازی برای بررسی نقش ژن احتمالی تیروزین آمینوترانسفراز در آرابیدوپسیس

پس از توالی یابی کامل ژنوم آرابیدوپسیس و شناسایی حدود 25498 ژن، نقش برخی از ژن ها در آن به صورت احتمالی تعیین شد. از جمله این موارد می توان به تعیین نقش هفت ژن در آرابیدوپسیس به عنوان ژن های احتمالی کد کننده آنزیم تیروزین آمینوترانسفراز اشاره نمود که تا به حال نقش سه ژن با تحقیقات انجام شده مورد تایید قرار گرفته است. در تحقیق حاضر، نقش ژن احتمالی دیگری از این خانواده با استفاده از آزمون مکمل سازی با باکتری اگزوتروف DL39 بررسی شد. به دلیل وقوع جهش در ژن تیروزین آمینوترانسفراز باکتری DL39، این باکتری برای اسید آمینه تیروزین اگزوتروف می باشد. به منظور بررسی توانایی ژن احتمالی تیروزین آمینوترانسفراز مورد نظر در مکمل سازی نقصان فعالیت تیروزین آمینوترانسفرازی باکتری، توالی ناحیه کد کنند ژن در ناقل های بیان pQE همسانه سازی شد و برای تراریختی باکتری DL39 مورد استفاده قرار گرفت. نتایج آزمون مکمل سازی موفقیت آمیز بود و باکتری های تراریخت شده قابلیت رشد در محیط بدون مکمل اسید آمینه تیروزین را بدست آوردند. بررسی فعالیت آنزیمی نیز نشان داد که آنزیم قادر است اسید آمینه تیروزین را به 4- هیدروکسی فنیل پیروات تبدیل نماید. نتایج بدست آمده در این تحقیق، نقش تیرزوین آمینوترانسفرازی ژن مورد بررسی را تایید می کند.