خالص سازی و تعیین ویژگی های بیوشیمیایی فنل اکسیداز همولمف شب پره برگ خوار توت Glyphodes pyloalis (Lep.: Pyralidae)

آنزیم فنل اکسیداز (EC 1.14.18.1)، یکی از آنزیم های کلیدی در رشد و ایمنی حشرات می باشد و مهار این آنزیم می تواند به عنوان روشی جدید برای کنترل آفات مورد استفاده قرار گیرد. شب پره برگ خوار توت (Glyphodes pyloalis Walker)، یکی از آفات مهم درختان توت در شمال ایران است که با تغذیه از برگ توت در پرورش کرم ابریشم اختلال ایجاد می کند. در این تحقیق، آنزیم فنل اکسیداز از همولمف شب پره برگ خوار توت با استفاده از رسوب با سولفات آمونیوم، کروماتوگرافی ژل و کروماتوگرافی تبادل یونی خالص شد. وزن ملکولی دو ایزوفرم آنزیم با استفاده از SDS-PAGE به ترتیب 69/66 و 70/53 کیلودالتون به دست آمد. اثرات بازدارنده ها نشان داد که روش مهارکنندگی 4-هگزیل رسورسینول از نوع رقابتی و اما برای کوئرسین هیدرات و کوجیک اسید از نوع مختلط می باشد. هم چنین، بررسی ویژگی های آنزیمی نشان داد که اسیدیته مطلوب و دمای بهینه آنزیم فنل اکسیداز به ترتیب برابر با 7 و 35 درجه سلسیوس بود و آنزیم در دماهای 40، 45 و 50 درجه سلسیوس تا 30 دقیقه پایدار بود. اثر یون های فلزی روی آنزیم خالص نشان داد که یون Zn2+ کاهشی معنی داری بر فعالیت آنزیم داشت.