تعیین توالی و بررسی خصوصیات مولکولی ژن بتا 1 و 4 اندوگلوکانازسویه Bacillus subtilis B5d

این پژوهش به منظور تعیین برخی ویژگی های کاتالیتیکی و خصوصیات مولکولی ژن کدکننده آنزیم بتا 1و4 اندوگلوکاناز در سویهBacillus subtilis B5d انجام شد. ژن کدکننده این آنزیم در سویه B5d توسط آغازگرهای اختصاصی تکثیر، تعیین توالی و در پایگاه اطلاعاتی NCBI ثبت شد. تجزیه توالی حاصله و رسم درخت فیلوژنی با استفاده از نرم افزار Vector NTI و Mega.4 انجام شد. براساس نتایج حاصله قطعه تعیین توالی شده شامل 794 نوکلئوتید بود که یک رشته پپتیدی با 264 اسیدآمینه را کد می کند. تجزیه توالی آمینواسیدی این ژن در سویه مورد بررسی نشان داد که آنزیم اندوبتاگلوکاناز تولید شده توسط سویه مورد پژوهش چندبخشی بوده که قسمت باند شونده به سلولز (Cellulose Binding Domain، CBD) آن مربوط به خانواده گلیکوزیدهیدرولاز 3 و قسمت کاتالیک (CD) آنزیم مورد بررسی متعلق به خانواده گلیکوزیدهیدرولاز 5 است. همچنین فعالیت آنزیم بتا 1و4 اندوگلوکاناز تولید شده توسط سویه B5d، در محدوده دمایی 70-30 درجه سانتی گراد و pH 6/4 مورد بررسی قرار گرفت. نتایج نشان داد که بیشترین فعالیت کاتالیتیک آنزیم بتا 1و4 اندوگلوکاناز در دمای 55 درجه سانتی گراد بوده که U/L 83/461 برآورد شد. بررسی پایداری آنزیم در شرایط دمایی و pH های مختلف نشان داد که تا دمای 60 درجه سانتی گراد و در محدوده pH 10-5 آنزیم پایداری بهتری دارد.