اثرات انجماد شیشه ای بر میزان آپویتوز در بلاستوسیست موش

در سال های اخیر، پیشرفت های زیادی در انجماد شیشه ای (virrification) برای نگهداری جنین صورت گرفته است؛ ولی تاکنون روش قابل اعتمادی در انجماد شیشه ای که بتواند میزان بالایی از زنده ماندن جنین را نشان دهد، ارائه نشده است. زیرا مکانیسم آسیب های جنین به دنبال انجماد شیشه ای به طور دقیق مشخص نشده است. مطالعه حاضر به منظور بررسی تاثیر انجماد شیشه ای بر روی میزان آپوپتوز در جنین در مرحله بلاستوسیست صورت گرفته است.
بدین منظور 95 عدد بلاستوسیست موش از نژاد Swiss Albino به طریق فلاش کردن شاخ رحم به دست آمد و به طور تصادفی به دو گروه تجربی (43) و کنترل (52) تقسیم شدند. در گروه کنترل بلاستوسیست ها پس از دریافت در محیط M16 به مدت دو ساعت کشت داده شدند و ایندکس آپوپتوز در آنها پس از نشانه گزاری با تکنیک TUNEL و رنگ آمیزی زمینه ای با PI مشخص شد. در گروه تجربی بلاستوسیست ها پس از دریافت بلافاصله به طریق انجماد شیشه ای با محلول EFS40 منجمد شدند و در تانک حاوی نیتروژن مایع به مدت یک ماه نگهداری شدند پس از طی مدت مذکور نی های حاوی بلاستوسیست ها ذوب گردیدند.
مقایسه نتایج نشان داد که میانگین تعداد بلاستومرهای در بلاستوسیست های گروه منجمد شده موش (44.91±2.47) نسبت به گروه کنترل (50.23±2.9)، اختلاف معنی داری ندارد. (p=0.176) درحالی که میانگین تعداد بلاستومرهای آپوپتوتیک در بلاستوسیست های گروه منجمد شده موش (4.08±0.28) نسبت به گروه کنترل (4.93±0.22) اختلاف معنی داری را نشان داد (p=0.02) و میانگین میزان ایندکس آپوپتوز بر حسب درصد در گروه فریز شده (11.87±0.63) به طور معنی داری نسبت به گروه کنترل (9.12±0.67) بیشتر بود. (P=0.004) این مطالعه نشان داد که انجماد شیشه ای باعث افزایش میزان آپوپتوز در بلاستومرهای بلاستوسیست موش می شود.