جداسازی، تایید هویت و بررسی قابلیت جذب سلولی اگزوزوم های مشتق از سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان انسانی

میکرووزیکول های مشتق از سلول به عنوان مکانیسمی نوین در زمینه ارتباطات سلول-سلول شناخته می شوند. اگزوزوم های مشتق از سلول های بنیادی مزانشیمی به عنوان مکانیسمی نوین در زمینه عملکرد پاراکراین سلول های بنیادی مزانشیمی قلمداد می شوند. در این راستا، اگزوزوم ها نقشی مهم در ارتباطات بین سلولی مابین سلول های بنیادی مزانشیمی و سلول های توموری بر عهده دارند.
اگزوزوم ها از محیط کشت سلول های بنیادی مزانشیمی توسط سانتریفوژ افتراقی تخلیص شد. اندازه و شکل ظاهری اگزوزوم های مشتق از سلول های بنیادی مزانشیمی توسط میکروسکوپ الکترونی نگاره بررسی شد. همچنین، اندازه اگزوزوم ها توسط تفرق دینامیکی نور سنجیده شد. آنالیز وسترن بلات برای نشانگر اگزوزومی CD9 انجام شد. اگزوزوم های تخلیص شده با رنگ فلورسنت PKH نشان‏دار شد. سلول های توموری تخمدان SKOV3 با اگزوزوم های نشان‏دار شده تیمار و جذب سلولی توسط میکروسکوپ فلورسنت بررسی شد.
میکروسکوپ الکترونی نگاره نشان داد که اگزوزوم های مشتق از سلول های بنیادی مزانشیمی دارای شکلی کروی با قطر مابین 30 الی 100 نانومتر است. همچنین اندازه اگزوزوم ها توسط سنجش فرق دینامیکی نور توزیع اندازه زنگوله ای شکل با بیشینه فراوانی 80 نانومتر را نشان داد. آنالیز وسترن بلات نیز بیان CD9 (نشانگر ویژه اگزوزومی) در اگزوزوم های تخلیص شده را نشان داد. همچنین بررسی میکروسکوپ فلورسنت نشان داد که اگزووزم های نشان‏دار شده با رنگ PKH26 می تواند توسط سلول های توموری SKOV3 با کارآمدی بالا جذب شود.
روش ارایه شده در زمینه جداسازی اگزوزوم ها از سلول های بنیادی مزانشیمی و تایید ماهیت و جذب آن ها توسط سلول های توموری، گامی مهم و پیش نیاز در زمینه درک عملکرد اگزوزوم ها در سلول های توموری برای مطالعات آینده است. بدیهی است توانایی در مطالعه زیستی جذب اگزوزوم ها توسط سلول های سرطانی فرصت های جدیدی در زمینه بررسی های عملکردی این نانووزیکول های طبیعی و محتویات آن ها در زمینه درمان سرطان فراهم می آورد.