بیان دگر ساخت ژن کد کننده یک ایزوفرم تیپ2 متالوتیونین گیاه برنج(OsMTI-2b) در اشرشیاکلی

متالوتیونین ها (MT) پروتئین های با وزن مولکولی کم، غنی از سیستیئن (Cys) هستند که به واسطه داشتن گروه های تیول آمینو اسید Cys توانایی اتصال به فلزات سنگین را دارند. در گیاهان ایزوفرم های مختلفی از MTوجود دارد که بر اساس آرایش سیستئین در چهار تیپ قرار می گیرند. در این تحقیق به منظور بررسی نقش ایزوفرم OsMTI-2b از گیاه برنج که متعلق به تیپ 2 می باشد، توالی کد کننده ی این ایزوفرم، در ناقل بیانی pET41a همسانه سازی و به باکتری E.coliسویه ی (DE3)Rosetta منتقل شد. پس از القا باکتری با IPTG تولید این پروتئین همراه با شریک الحاقی GST در فاز محلول تایید شد. سویه شاهد نیز با انتقال پلاسمید بدون ژن به سویه (DE3)Rosetta تولید شد. مقایسه منحنی های رشد سلول های باکتری بیان کننده ی پروتئین های نوترکیب با باکتری شاهد نشان داد سویه های بیان کننده OsMTI-2b در محیط حاوی فلزات Pb، Cd، Ni وZn تحمل بیش تری نسبت به سویه شاهد دارند. هم چنین اندازه گیری فلزات در محیط کشت نشان داد که در محیط کشت سویه R-MTI-2b فلزات Pb، Cd، Ni، Znو Cuبه ترتیب به میزان 7/0±85//15، 8/0±07/13، 8/0± 8/11، 75/0±51/ 14 و 6/0±47/7 میلی گرم بر لیترکاهش یافت. در مقایسه با این سویه میزان فلز در محیط کشت سویه شاهد بدون تغییر باقی ماند.