تولید شکل نوترکیب گلوتاردوکسین گیاه برنج در باکتری اشریشیاکلی

گلوتاردوکسین ها (Grxها) پروتئین هایی با وزن مولکولی پایین هستند که با داشتن یک گروه تیول-دی سولفید در جایگاه فعالشان در احیا برگشت پذیر پیوندهای دی سولفیدی نقش دارند. این پروتئین ها توسط آنزیم گلوتاتیون ردوکتاز توسط مولکول گلوتیون احیا می شوند. سپس این پروتئین خود در احیای باندهای دی سولفیدی پروتئین های دیگر دخالت دارد. ایزوفرم های مختلفی از Grx در گیاهان وجود دارد. در پژوهش حاضر توالی ژن کد کننده ایزوفرم OsGrx9 از گیاه برنج پلاسمید بیانی pET28a، همسانه سازی و سپس به سویه ی مناسبی از باکتری اشریشیا کلی به نام (DE3) Rosetta منتقل شد. با تحریک پروموتر T7 به وسیلهی IPTG، میزان مناسبی از پروتئین نوترکیب His-OsGrx9 در فاز محلول باکتری تولید شد و سپس با استفاده از روش کروماتوگرافی تمایلی خالص سازی شد .فعالیت احیایی این ایزوفرم نوترکیب تولید شده با استفاده از انسولین به عنوان سوبسترای الکترون گیرنده و حضور DTTیا GSH به عنوان عوامل احیا کننده مورد بررسی قرار گرفت. نتایج نشان داد که Grx9 در محیط این ویترو به خوبی فعال می باشد. به نظر می رسد فعالیت این پروتئین در حضور GSH کاملا وابسته به pH محیط می باشد.