بررسی بیوشیمیایی انواع پروتئازهای گوارشی اختصاصی در کفشدوزک Cryptolaemus montrouzieri Mulsant (Col.: Coccinellidae) و تاثیر طعمه-های مختلف بر فعالیت آنها

انواع و ویژگی های بیوشیمیایی پروتیازهای گوارشی در لاروها و افراد بالغ کفشدوزک شکارگر Cryptolaemus montrouzieri Mulsantبا استفاده از سوبستراها و بازدارنده های اختصاصی تعیین و تغییر فعالیت آنها پس از تغذیه روی طعمه های مختلف ارزیابی شد. کفشدوزک ها در شرایط آزمایشگاه پرورش یافته و با شپشک آرد آلود تغذیه شدند. تشریح بدن در محیط کلرید سدیم انجام شد و لوله گوارش نمونه ها همگن و سانتریفیوژ شد. سپس فعالیت انواع پروتیازهای گوارشی تحت تاثیر سوبستراها و بازدارنده های اختصاصی و با تغذیه از سه میزبان تعیین شد. نتایج نشان داد که فقط سیستیین پروتیازها و اگزوپپتیدازها در معده افراد بالغ فعال بودند، اما در لاروها، سرین و سیستیین پروتیازها نیز در هضم نقش داشتند. بیشترین فعالیت سرین پروتیازهای تریپسین، کیموتریپسین و الاستاز لاروها به ترتیب در اسیدیته های 8، 8-9 و 9 به دست آمد. اسیدیته بهینه فعالیت کاتپسین های B و L به ترتیب در مقادیر 6 و 5 در لاروها و افراد بالغ کفشدوزک C. montrouzieriتعیین شد. بیشترین فعالیت آمینو- و کربوکسی پپتیداز گوارشی لاروها در اسیدیته 7 اندازه گیری شد، اما این دو آنزیم در افراد بالغ به ترتیب در اسیدیته های 7 و 6 بیشترین فعالیت را نشان دادند. بازدارنده های اختصاصی سیستاتین، E-64، TLCK، SBTI، TPCK و AEBSF.HCL سبب کاهش معنی دار فعالیت پروتیازهای اختصاصی لاروها و افراد بالغ C. montrouzieriشدند. تفاوت معنی داری در فعالیت سرین پروتیازها، اگزوپپتیدازها و کاتپسین L لاروهای تغذیه شده از شپشک آردآلود مرکبات Planococcus citri، شپشک آردآلود چای Pseudococcus viburniو شته چای Toxoptera aurantiiمشاهده نشد، اما سیستیین پروتیازها و آمینوپپتیداز افراد بالغ تغذیه شده از شته چای کمترین فعالیت را از خود نشان دادند. تفاوت پروفایل پروتیازی در لاروها و افراد بالغ این کفشدوزک موید تفاوت فیزیولوژیک این دو مرحله زیستی و اهمیت سرین پروتیازها در فرآیندهای حفظ و نگهداری شرایط رشدی دستگاه گوارش است. علاوه براین، فعالیت بیشتر سیستیین پروتیازها در افراد بالغ به ماهیت طعمه مصرف شده و وجود ترکیبات مختلف پروتیینی و حتی گلیکوپروتیینی در طعمه ها باز می گردد.