طراحی، تولید و ارزیابی وایروزوم از ویروس آنفلوانزا ساب تایپ H1N1

در دو دهه گذشته، اولین نسل از وایروزوم های آنفلوانزا گسترش پیدا کرد. وایروزوم های آنفلوانزا به دلیل کاربرد آن ها در زمینه های مختلف پزشکی به عنوان ابزاری نوین در برنامه های ساخت واکسن و ایمونوتراپی به حساب می آیند. هدف از مطالعه حاضر، ساخت وایروزوم کاتیونیک مشتق شده از ویروس آنفلوانزا با استفاده از دترجنت با قابلیت دیالیز (DCPC) و لیپید کاتیونیک (DOTAP) در شرایط آزمایشگاهی می باشد.

مواد و روش ها:

 ویروس آنفلوانزا سویه (H1N1)A/Puerto Rico/8/34 در رده سلولی اپیتلیال کلیه سگ سانان تکثیر داده شد. پوشش ویروس آنفلوانزا با استفاده از DCPC به عنوان یک دترجنت حل گردید و با استفاده از دیالیز، این دترجنت حذف شده و با افزودن لیپید کاتیونیک DOTAP، وایروزوم کاتیونیک سنتز شد. میزان سمیت سلولی وایروزوم سنتز شده با روش MTT مورد ارزیابی قرار گرفت و حضور پروتئین های هماگلوتنین و نورآمینیداز با استفاده SDS-PAGE مورد بررسی قرار گرفت. مورفولوژی وایروزوم ساخته شده از طریق میکروسکوپ عبوری بررسی شد.

یافته ها: 

غلظت نهایی وایروزوم ساخته شده، 5/1 میلی گرم در میلی لیتر بود. با استفاده از SDS-PAGE، حضور پروتئین های هماگلوتینین و نورآمینیداز تایید شد. همچنین در مقایسه با گروه کنترل، سایتوتوکسیسیته پس از 48 ساعت از تیمار با غلظت های مختلف وایروزوم کاهش معنی داری داشت (05/0<p).

نتیجه گیری:

 استفاده از دترجنت DCPC و همچنین لیپید کاتیونیک DOTAP یک روش موثر در بازآرایی پوشش ویروس آنفلوانزا بدون ایجاد تغییرات در گلیکوپروتئین های سطحی ویروس می باشد. روش به کار رفته در تحقیق حاضر برای تولید وایروزوم، پتانسیل مناسبی در برنامه های طراحی واکسن آنفلوانزا در آینده خواهد داشت.