ساخت ناقل های حاوی ترکیبات ژنی WRI1 و LPAAT و انتقال آن ها به گیاه توتون

در گیاهان دانه روغنی تعدادی از ژن های دخیل در مسیر ساخت تری آسیل گلیسرول شناسایی شده اند که تغییر در بیان این ژن ها سبب افزایش محتوای روغن دانه شده است. ژن های WRI1 و LPAAT از ژن های کلیدی در این مسیر سنتزی هستند که بیش بیان این ژن ها می تواند سبب افزایش محتوای روغن شود. در این تحقیق به منظور افزایش میزان روغن دانه، ناقل های بیانی حامل ژن های WRI1 و LPAAT طراحی و ساخته شدند. ژن های سنتزی WRI1 و LPAAT با استفاده از آنزیم های برشی اختصاصی از ناقل همسانه سازی PGH.WRI1 و PGH.LPAAT جدا و به صورت منفرد و جفتی در ناقل حد واسط PGH.O3.2.2 که حامل پیشبرهای اختصاصی SBP و Napin و خاتمه گر E9 می باشد، همسانه سازی شدند. کاست های ژنی به ناقل بیانی دوگانه pBin19 وارد شدند. ناقل های نهایی بهAgrobacterium tumefacience  سویه EHA105 منتقل و جهت بررسی صحت ساخت و بیان قطعه ژنی، در تراریختی گیاه مدل توتون به کار گرفته شدند. ارزیابی مولکولی گیاهان تراریخت، حضور و فعالیت ژن WRI1 و LPAAT را تایید کرد. بذور حاصل از گیاهان تراریخت در نسل بعد در محیط کشت حاوی کانامایسین، گیاهچه هایی سالم و قوی تولید کردند.