شناسایی کاندیدمی به روش آگلوتیناسیون با استفاده از نانوذرات طلا

 کاندیدمی عفونتی بسیار مهم از نظر ابتلا و مرگ و میر است و باید به سرعت تشخیص داده و درمان شود. هدف از این مطالعه، ارایه ی یک روش ساده و سریع جهت تشخیص مستقیم مخمر کاندیدا در خون، با استفاده از آنتی بادی متصل به نانوذرات طلا به روش اگلوتیناسیون می باشد.

در مطالعه ی حاضر، 40 نمونه از BACTEC مثبت به لحاظ فونگمی تهیه شد. عوامل عفونی با استفاده از روش های مرفولوژی و روش مولکولی PCR-RFLP تعیین گونه شدند. ابتدا از عوامل جدا شده از کاندیدمی مخلوطی از آنتی ژن تهیه نموده و جهت تولید آنتی بادی به خرگوش سالم همراه با ادجوانت کامل تزریق شد. پس از تزریق چهار یادآور همراه با ادجوانت ناقص، نهایتا از خرگوش خون گیری و سرم تهیه شد. تولید آنتی بادی و کارآیی آن به روش الایزا تایید گردید و نانوذرات طلا به روش شیمیایی، به آنتی بادی ها متصل شدند. روش نانوذره برای تشخیص سریع کاندیدمی، بر روی خون مستقیم از بیماران و خون آلوده شده به تعداد مشخص مخمر کاندیدا در محیط آزمایشگاه مورد بررسی قرار گرفت.

کاندیدا آلبیکنس و پس از آن کاندیدا گلابراتا و کمپلکس کاندیدا پاراپسیلوزیس شایع ترین عوامل کاندیدمی بودند. در تعیین cut off روش نانوذره، حداقل مخمر قابل شناسایی در خون بیمار، یک مخمر بود. حساسیت و ویژگی روش نانوذره برای شناسایی مخمر کاندیدا در خون چهار بیمار در مقایسه با کشت خون، 100 درصد محاسبه شد.

تحت شرایط آزمایشگاهی ما، اگر 15 میکرولیتر از خون فرد مشکوک به کاندیدمی که حاوی 1 مخمر یا حتی فقط آنتی ژن های کاندیدا باشد، در صورت مجاورت با 35 میکرولیتر از آنتی بادی کنژوگه شده با نانوذره، در کمتر از یک دقیقه آگلوتینه خواهد شد.