شناسایی، کلونینگ، خالص سازی و تعیین عملکرد آنزیم نوترکیب زایلاناز برگرفته از نمونه متاژنومی شکمبه گاو

طیور مانند بسیاری از حیوانات از آنزیم ها برای هضم غذا استفاده می کنند. آنزیم ها مهمترین مواد افزودنی در صنعت تولید خوراک حیوانی محسوب شده و موجب بهبود هضم غذا می شوند. از سوی دیگر، پیش تیمار خوراک طیور با آنزیم زایلاناز موجب بالا رفتن ارزش غذایی و افزایش هضم غذا در سیستم گوارش حیوان می شود. در این مطالعه با استفاده از روش های محاسباتی بیوانفورماتیکی از داده های متاژنومی شکمبه گاو یک ژن مقاوم به حرارت زایلاناز با استفاده از نرم افزار TAXyl شناسایی و PersiXyn9 نامگذاری شد و به منظور تعیین کارکرد آنزیمی تحت بررسی های آزمایشگاهی قرار گرفت. ژن زایلاناز موردنظر توسط پرایمرهای اختصاصی از دی.ان.ای متاژنومی جداسازی و در وکتور بیانی مناسب کلون شد و سپس بیان و خالص سازی آنزیم مذکور انجام شد. بررسی پارامترهای بیوشیمیایی در خصوص این آنزیم نشان داد که بهینه فعالیت آن در دمای °C50 بوده و از طرفی pH بهینه فعالیت آن نیز 6 است. شاخص های بیوشیمیایی Km و Vmax برای این آنزیم به ترتیب برابر 1/22mg/ml و 206/78μmol min-1 mg-1 محاسبه شد. تصاویر مربوط به میکروسکوپ الکترونی روبشی (SEM) از فعالیت این آنزیم بر روی خوراک طیور در دمای °C50 کارایی بالای این آنزیم را به عنوان افزودنی در صنعت خوراک طیور نشان داد.