جداسازی ژن CYP72A154 به عنوان ژن درگیر در مسیر بیوسنتز گلیسیریزین در Glycyrrhiza glabra L. (شیرین بیان ایرانی)
سیتوکروم P450 نقش مهمی در واکنش های اکسیداتیو در طول بیوسنتز متابولیت های ثانویه از جمله ترپنوییدها ایفا می کند.
هدف از این تحقیق شناسایی ژن CYP72A154 به عنوان ژن دخیل در مسیر بیوسنتز گلیسیریزین در شیرین بیان ایرانی بود.
ژن CYP72A154 از شیرین بیان ایرانی جدا و در ناقل PTG19-T کلون شد. پس از تایید طول قطعه، پلاسمید نوترکیب برای تعیین توالی ارسال شد. از NCBI BLAST برای تجزیه و تحلیل همولوژی توالی نوکلیوتیدی/پروتیینی بین Glycyrrhiza glabra و سایر گیاهان استفاده شد. توصیف توالی های اسید آمینه پیش بینی شده مانند همسانی توالی، دومین های پروتیینی و مکان های عملکردی، با استفاده از InterProscan انجام شد. RT-PCR برای بررسی بیان نسبی این ژن در ریشه شیرین بیان انجام شد.
طول کوآری 314 aa بود که پس از بghست در NCBI حدود 78 تا 80 درصد یکسانی با سیتوکروم P450 72A154 و 11-oxo-beta-amyrin 30-oxidase در گونه های G. glabra ،G. uralensis و G. pallidiflora و همچنین حدود 64 تا 67 درصد با سایر گونه های خانواده Fabaceae داشت. تجزیه و تحلیل TMHMM نشان داد که تعداد Expe اسیدآمینه ها در TMH ها 22/11931 و تعداد Exp ،60 آمینو اسید اول 20/013 بود. نتایج RT-PCR نشان داد که بیان این ژن با ژن b-AS و CYP88D6 که هر دو در مسیر بیوسنتز گلیسیریزین نقش دارند، قابل مقایسه است.
نتیجه گیری:
با توجه به تجزیه و تحلیل بیوانفورماتیک و RT-PCR می توان بیان کرد که قطعه مورد نظر متعلق به ژن CYP72A154 بوده و در بیوسنتز گلیسیریزین نیز نقش دارد.
- حق عضویت دریافتی صرف حمایت از نشریات عضو و نگهداری، تکمیل و توسعه مگیران میشود.
- پرداخت حق اشتراک و دانلود مقالات اجازه بازنشر آن در سایر رسانههای چاپی و دیجیتال را به کاربر نمیدهد.