پایداری هموپلاسمی و توارث سیتوپلاسمی داربست پروتئینی دارپین G3 در تکثیر زایشی و رویشی گیاهان ترانسپلاستوم توتون

مهندسی پلاستید مزایای بی شماری را برای نسل بعدی فناوری تراریختی گیاهی به ارمغان می آورد که شامل تسهیل انباشت تراژن ها و تولید سطوح بیان بالای پروتیین های نوترکیب می باشد. پروتیین های تکرار آنکرینی طراحی شده (دارپین ها) پروتیین های داربست غیرایمونوگلوبولینی نسبتا کوچکی هستند که با تمایل بالا به اهداف اختصاصی خود متصل می شوند. G3 یک نوع دارپین طراحی شده برای اتصال به پروتیین گیرنده تیروزین کیناز HER2 (گیرنده 2 فاکتور رشد اپیدرمی انسان) است. در مطالعه قبلی یک فرآیند زیستی برای تولید دارپین G3 به عنوان عامل تصویربرداری در سرطان های با بیان بالای HER2 در سیستم بیان کلروپلاستی توتون تولید شد. در این مطالعه، پایداری هموپلاسمی و بیان ژن دارپین G3 در نسل رویشی و زایشی گیاهان T1 ترانسپلاستوم توتون مطالعه شد. تایید حضور ژن دارپین G3 در گیاهان ترانسپلاستوم با استفاده از واکنش PCR انجام شد. آنالیز لکه گذاری سادرن وضعیت هموپلاسمی گیاهان ترانسپلاستوم را تایید کرد. آنالیز لکه گذاری وسترن تجمع دارپین G3 را در کلروپلاست نسل بعدی گیاهان ترانسپلاستوم تایید کرد. محتوی دارپین G3 تولید شده در کلروپلاست گیاهان ترانسپلاستوم با استفاده از الایزا برای پروتیین محلول کل کلروپلاست حدود 33 درصد برآورد شد. نتایج این مطالعه تایید کرد که ژن دارپین G3 در گیاهان رویشی و زایشی نسل T1 گیاهان توتون ترانسپلاستوم به صورت پایدار و در سطوح بالا بیان می شود.