ارزیابی اثر هدف گیری درون سلولی روی تجمع نانوبادی نوترکیب Anti-VEGF در گیاه کدو

زراعت مولکولی در سه دهه ی اخیر به عنوان یک استراتژی جایگزین و مقرون به صرفه برای تولید موفق صدها پروتیین نوترکیب دارویی در مقیاس بالا با استفاده از گیاهان ظهور کرده است. از آنجا که سلول های توموری برای رشد و تهاجم به رگزایی نیاز دارند، لذا هدف گیری مهمترین فاکتور رگزایی یعنی فاکتور رشد اندوتلیال عروقی (VEGF) با استفاده از پروتیین نوترکیب دارویی Anti-VEGF بیان شده در گیاه می تواند به عنوان یک رویکرد موثر برای مهار رگزایی و درمان سرطان عمل نماید. یکی از مشکلات اصلی برای تجاری سازی زراعت مولکولی سطح بیان پایین پروتیین نوترکیب می باشد. بنابراین رویکردهای متعددی از جمله استفاده از پیش برنده های قوی رونویسی، بهینه سازی کدونی توالی پروتیین، هدف گیری درون سلولی مناسب و آزمون سیستم های بیانی مختلف مبتنی بر گیاه برای افزایش بیان پروتیین ایجاد شده است. در این مقاله، اثر هدف گیری آپوپلاستی و شبکه آندوپلاسمی روی تجمع پروتیین نوترکیب Anti-VEGF در گیاه کدو بررسی شد. بدین منظور، آنالیزهای مولکولی مختلف (RT-PCR، Dotblot،SDS-PAGE ، Westernblot و ELISA) انجام شد. نتایج نشان داد که هدف گیری به شبکه آندوپلاسمی می تواند منجر به تجمع بالاتر پروتیین نوترکیب (شش برابر) نسبت به آپوپلاست شود. بنابراین شبکه آندوپلاسمی می تواند مکان مناسب تری برای بیان پروتیین نوترکیب هدف و سایر پروتیین های نوترکیب دیگر نسبت به آپوپلاست باشد.