بررسی حضور و سطح بیان ژن های rpoS، relA و mazF در طول تشکیل بیوفیلم در بازه های زمانی مختلف در استافیلوکوکوس اپیدرمیدیس

استافیلوکوکوس اپیدرمیدیس پاتوژنی فرصت طلب است که در ایجاد عفونت های مرتبط با استفاده از ایمپلنت ها و وسایل پزشکی نقش دارد. تشکیل بیوفیلم از جمله مهم ترین فاکتورهای بیماری زایی این میکروارگانیسم محسوب می شود که تا حد زیادی به عوامل مختلفی از جمله پروتیین های مختلف بستگی دارد. بنابراین مطالعه حاضر با هدف بررسی سطح بیان سه پروتیین rpoS، relA و mazF در استافیلوکوکوس اپیدرمیدیس در فواصل زمانی مختلف در طول دوره تشکیل بیوفیلم انجام شد.

در مطالعه مورد شاهدی حاضر حضور ژن های rpoS،relA  وmazF  با استفاده از روش PCR در سویه استاندارد استافیلوکوکوس اپیدرمیدیس ATCC 12228 بررسی  شد. میزان تولید بیوفیلم به روش میکروتیترپلیت (MTP) بررسی شد. سطح بیان ژن های مورد مطالعه پس از 2، 8 و 24 ساعت در طول دوره تشکیل بیوفیلم با استفاده از تکنیک Real- time PCR سنجش شد. داده ها با استفاده از نرم افزار آماریGraphPad Prism 8 (GraphPad Software, Inc) تجزیه و تحلیل شدند. آزمون واریانس یک طرفه برای بررسی میانگین تغییرات بیان ژن های مورد مطالعه استفاده شد و 0/05P-value <   معنادار در نظر گرفته شد.

سویه استافیلوکوکوس اپیدرمیدیس واجد تمام ژن های مد نظر بود و دارای قدرت تشکیل بیوفیلم قوی بود. ژن های مورد مطالعه سطوح بیان متفاوتی را در فواصل زمانی مختلف در طول تشکیل بیوفیلم با روش Real- time PCR نشان دادند. سطح بیان rpoS در 24 ساعت بالاترین میزان بود (0/252 ± 6/7) (0/001p<). در حالی که ژن mazF بالاترین سطح بیان را در 8 ساعت (0/208 ± 6) (0/001p <) در طول دوره تشکیل بیوفیلم نشان داد. علاوه بر این، سطح بیان ژن relA در 2 ساعت (0/361 ± 3/9) (0/001p <) به اوج خود رسید و سپس در ساعت 8 (0/265± 1/7) و 24 (0/153 ± 1/2) به تدریج کاهش یافت (0/05p <). همچنین نتایج مقایسه میزان تغییرات بیان ژن rpoS نسبت به ژن relA (1/175 ± 2/667) و همچنین ژن mazF (1/175 ± 0/2333) با استفاده از Dunnett's multiple comparisons test معنادار نبود
(0/05p >).

نتایج ما اهمیت پروتیین های rpoS، relA و mazF را در ایجاد و توسعه ساختار بیوفیلم در سویه مورد بررسی نشان می دهد. علاوه بر این، نتایج ما نقش مهم پروتیین rpoS را در طول تشکیل بیوفیلم و اهمیت پروتیین relA را در آغاز مراحل تشکیل بیوفیلم نشان داد.