ارزیابی کارایی آنتی سرم پلی کلونال علیه موتیف حفظ شده هماگلوتینین ویروس آنفلوانزا در تشخیص ویروس های هومولوگ و هترولوگ

بیماری آنفلوانزای پرندگان تحت تیپ H9N2 از مهم ترین بیماری های ویروسی ماکیان در کشورهای آسیایی به شمار می رود. جهش های متعددی که در گلیکوپروتیین سطحی هماگلوتینین HA به عنوان آنتی ژن اصلی ویروس رخ می دهند، تفسیر نتایج آزمایش های سرولوژی برپایه HA را با مشکل مواجه می کنند.

در مطالعه تجربی حاضر، توانایی آنتی بادی پلی کلونال علیه موتیف حفاظت شده پروتیین HA در شناسایی جدایه های هترولوگ H9N2 مورد بررسی قرار گرفت.

روش کار: 

بر اساس داده های بیوانفورماتیک، موتیف حفاظت شده پروتیین HA انتخاب و در ناقل (+)pET-28a بیان شد. برای تولید آنتی سرم پلی کلونال، پپتید نوترکیب با ادجوان روغنی مخلوط و به جوجه های SPF تزریق شد. به طور مشابه آنتی سرم حاصل از ویروس غیرفعال تهیه شد. کارایی آنتی سرم ها در آزمایش ممانعت از هماگلوتیناسیون HI متقاطع با ویروس های H9N2 هومولوگ و هترولوگ مورد ارزیابی قرار گرفت.

در واکنش با آنتی سرم پلی کلونال، میانگین عیار آنتی بادی HI علیه ویروس های هومولوگ و هترولوگ یکسان و برابر 5 برآورد شد. این عیار با آنتی سرم ویروس غیرفعال برای ویروس هومولوگ 7 و برای ویروس های هترولوگ بسیار کمتر برآورد شد. این اختلاف از نظر آماری معنی دار بود.

نتیجه گیری نهایی: 

با ارزیابی های انجام شده این آنتی سرم دارای کارایی مناسب در شناسایی جدایه های متفاوت ویروس H9N2 می باشد و در مقایسه با آنتی سرم معمول با دقت بیشتری آنتی ژن های مختلف یک تحت تیپ را تشخیص می دهد. آنتی سرم پلی کلونال حاصل فاقد بازدارنده ‏های غیراختصاصی می باشد که ممکن است تفسیر یافته ‏های سرولوژی را با مشکلاتی مواجه نماید؛ این نتایج نشان داد آنتی سرم پلی کلونال توان شناسایی ویروس های H9N2 جدا شده در سال های مختلف با آزمایش HI را دارد، هرچند معتبرسازی آن مستلزم انجام آزمایش با تعداد بیشتر ویروس است.