جداسازی و شناسایی استافیلوکوکوس اورئوس از شیر خام و بررسی اثر سوپرناتانت بدون باکتری بیفیدوباکتریوم بیفیدوم بر بیان ژن های انتروتوکسین در آنها

هدف این تحقیق شناسایی و جداسازی ژن های دخیل در تولید انتروتوکسین های استافیلوکوکی در سویه های جدا شده از شیر گاو فرآوری نشده و بررسی تاثیر مایع رویی فاقد سلول پروبیوتیک بیفیدوباکتریوم بیفیدوم بر بیان آنها بود. روش های استاندارد بیوشیمیایی و رنگ آمیزی گرم برای جداسازی و شناسایی سویه های استافیلوکوک در شیر فرآوری نشده استفاده شد. PCR برای شناسایی سویه های حامل ژن انتروتوکسین استفاده شد. سویه های واجد ژن های هدف در مجاورت مایع رویی بدون سلول B. bifidum (CFS) قرار گرفتند و سطح بیان ژن ها با استفاده از Real-time PCR اندازه گیری شد. با استفاده از توالی یابی 16SrDNA، رابطه فیلوژنیک سویه های جدا شده مشخص شد. تجزیه و تحلیل نشان داد که باکتری هایی مانند گونه های استافیلوکوکوس در 72 درصد از نمونه ها یافت شد. تست PCR وجود سوپرآنتی ژن های مختلف SE شامل SEA (16.7%)، SEC (11.7%)، SED (8.3%)، SEE (6.7%) و SEB (1.7%) را در سویه های جدا شده نشان داد. B. bifidum CFS فعالیت ضد میکروبی آشکاری در برابر سویه های 24، 51، 54 و 35 گونه های استافیلوکوک داشت و مقادیر MIC و MBC برای این سویه های تیمار شده با B. bifidum CFS در محدوده 31.25 میکروگرم بر میلی لیتر تا 125 میکروگرم در میلی لیتر بود. سویه های 51 و 24 به ترتیب با S.aureus ATCC 25923 و سویه های 54 و 35 با S.aureus ATCC 12600 در یک خوشه قرار گرفتند. RT-PCR نشان داد که پروبیوتیک های CFS بیان ژن های SEA، SEB، SEC و SEE را سرکوب می کنند (05/0p<). میانگین تغییر سطح بیان ژن برای ژن های SEA، SEB، SEC و SED به ترتیب 1.681-، 1.28-، 1.52- و 0.84- بود. این تحقیق نشان داد که باکتری های پروبیوتیک می توانند تولید انتروتوکسین را با کاهش بیان ژن های انتروتوکسین های استافیلوکوک کاهش دهند.