اثر تراکم میکروسپور و اندازه جنین بر جنین زایی، ریشه زایی، تشکیل نوساقه و تولید جنین های ثانویه در کلزا

هدف از انجام این آزمایش تولید گیاهان هاپلوئید کلزا با استفاده از روش کشت میکروسپور به منظور استفاده در برنامه های اصلاحی می باشد. بدین منظور گیاهان مادری از رقم گلوبال در دمای C°10/15 (شب/روز 8/16 ساعت) کشت شدند. پس از 90 روز میکروسپورهای مرحله تک هسته ای انتهایی تا ابتدای دو هسته ای از غنچه هایی به طور mm 5/3-5/2 جدا و در محیط کشت NLN-13 کشت گردیدند. کشت ها به مدت دو هفته در C°30 و تاریکی قرار داده شدند، سپس به مدت 20 روز به دمای C°25 و روی لرزاننده منتقل گردیدند. تیمارهای آزمایش جنین زایی شامل تراکم های مختلف 60 هزار، 40 هزار و 20 هزار میکروسپور در هر میلیلیتر محیط کشت و تیمارهای آزمایش باززایی، اندازه های مختلف جنین (5-6mm، 3-4mm، 2-3mm و بزرگتر از mm6) بودند. در آزمایش باززایی، صفات مختلف باززایی گیاه از قبیل، درصد تولید نوساقه، تولید جنین های ثانویه و ریشه زایی مطالعه گردید. نتایج نشان داد که سه تراکم میکروسپور در سطح 1% اختلاف معنی داری داشتند. تراکم 60 هزار به طور متوسط با تولید 33/031 جنین در هر پتری دیش (حاوی m5/12 محیط کشت)، بهترین تراکم در این آزمایش بود. اندازه های مختلف جنین برای صفات تولید نوساقه با برگ های نرمال و ریشه زایی در سطح 1% و برای تولید جنین های ثانویه در سطح 5% اختلاف معنی داری نشان دادند و 33/73% جنین های بزرگتر از mm6 تولید نوساقه با برگ های نرمال کردند و بهترین شکل باززایی را نشان دادند. در این آزمایش 43% جنین ها باززایی شدند.