توسعه و معتبرسازی روش HPLC-UV برای آنالیز سولفاسالازین در پلاسما انسانی

در این مطالعه، یک روش سریع، ساده و پیشرفته بر اساس کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا فاز معکوس (RP-HPLC) برای آنالیز کمی سولفاسالازین در پلاسمای انسان توسعه داده شد.

سولفاسالازین با استفاده از روش ساده رسوب دهی پروتئین، بوسیله استونیتریل، از پلاسما استخراج گردید. شرایط کروماتوگرافی شامل ترکیب فاز متحرک، سرعت آن، حجم تزریق و دمای آون بهینه شد. سپس روش توسعه یافته بر اساس خطی بودن، انتخابی بودن، صحت، دقت، حد تشخیص و حد اندازه گیری معتبرسازی شد. 

جهت بررسی سولفاسالازین از ستون C18 Brisa LC2 (250 mm × 4/6 mm, 5μ) استفاده شد. شستشو در حالت ایزوکراتیک با فاز متحرکی متشکل از مخلوط استونیتریل: آمونیوم استات 10 میلی مولار با pH معادل 6/4 (70:30) و سرعت جریان 1.0 میلی لیتر در دقیقه و دمای اتاق انجام شد. شناسایی سولفاسالازین با شناساگر UV در طول موج 361 نانومتر انجام شد. نمودار کالیبراسیون سولفاسالازین در پلاسمای انسانی در محدوده 50-125/3 میکروگرم در میلی لیتر با ضریب همبستگی 9999/0r2> خطی بود. حد تشخیص و اندازه گیری روش به ترتیب 5/0 و 5/2میکروگرم در میلی لیتر محاسبه شد.

می توان گفت که روش HPLC-UV توسعه یافته و تاییدشده برای تعیین دقیق سطح پلاسمایی سولفاسالازین در مطالعات فارماکوکینتیک فرمولاسیون های جدید مناسب است.