تشخیص سویه های مایکوباکتریوم توبرکلوزیس کمپلکس با استفاده از روش اسپولیگوتایپینگ در بیماران مراجعه کننده به بیمارستان مسیح دانشوری

هدف از این مقاله شناسایی و تمایز الگوی ژنتیکی سویه های مایکوباکتریوم توبرکلوزیس کمپلکس بیماران مسلول با استفاده از پلی مرفیسمDR(Direct Repeat) با روش اسپولیگوتایپینگ می باشد.
کشت مثبت متلعق به 238 بیمارمبتلا به سل ریوی از نظر اسپولیگوتایپینگ مورد بررسی قرار گرفت. جداسازی اولیه ی سویه های مایکوباکتریوم باروش پتروف 4 درصد و با استفاده از محیط جنسون Lowenstein Jensen (LJ) انجام شد و برای شناسایی سویه ها از آزمایشات بیوشیمیایی از قبیل، نیاسین، فعالیت کاتالاز، احیای نیترات استفاده شد. حساسیت دارویی در برابر ایزونیازید (2/0 میکروگرم در میلی لیتر)، ریفامپین (40 میکروگرم در میلی لیتر، استرپتومایسین (10 میکروگرم در میلی لیتر) و اتامبوتول (2میکروگرم در میلی لیتر) به روش تناسبی انجام و سویه ها به سه گروه حساس، MDR و غیر MDR تقسیم بندی شدند. سپس DNA از کلنی های مثبت با روش CTAB استخراج گردید. قطعات مورد نظر با روش PCR تکثیر شده و پس از دناتوره کردن قطعه ی تکثیر شده، عمل هیبریداسیون با آنزیم استرپتاویدین پر اکسیداز به روشLine Reverse Blot صورت گرفت. با اضافه کردن مقداری لومینسانس و قرار دادن غشاء بر روی فیلم X-ray، رادیوگرافی انجام گردید.
سویه ها به 9 دسته (،CAS1،CAS2 Beijing، Haarlem، U، T1،T2، EAI2 EAI3) متمایز شدند، که بیشترین تعداد مربوط به سویه ی Haarlem (27 درصد، 238/66) و CAS1 (25 درصد، 238/60) می باشد. همچنین با این روش دو سویه ی متعلق به مایکوباکتریوم بویس شناسایی شد.
این روش سریع، ساده و دارای حساسیت بالا برای تمایز سویه های مایکوباکتریوم توبرکوزیس و مطالعات اپیدمیولوژی می باشد.