جداسازی و شناسایی رده های سلولی اسپرماتوژنیک بافت بیضه موش

ارزیابی کیفیت و کارآمدی دو روش Sedimentation Velocity at Unit Gravity و سانتریفیوژ شیب غلظتی پرکل در جداسازی سلولهای اسپرماتوژنیک بافت بیضه هدف اصلی این مطالعه را تشکیل میدهد. طی این مطالعه تلاش شده است در نهایت یک مدل موفق با هزینه پایین، دسترسی بالا و خلوص به نسبت مطلوب پیشنهاد شود.
بافت بیضه موشهای نژاد NMRI از بدن خارج و به محیط کشت Ham’s F0 منتقل گردید. با کمک روش های جداسازی مکانیکی و هضم آنزیمی، سلولهای بافت از یکدیگر جدا شدند. سپس جداسازی سلولهای مخلوط با دو روش سانتریفیوژ شیب غلظتی پرکل (Percoll Gradients Centrifugation) در دو مرحله و (SVUG; Sedimentation Velocity at Unit Gravity) بر اساس شیب غلظتی آلبومین سرم انسانی (Human Serum Albumin; HSA) انجام گردید و در نهایت جهت شناسایی سلولهای تفکیک شده از روش رنگآمیزی (MGG; May-Grunwald-Giemsa) استفاده شد. با استفاده همزمان این دو روش میتوان جمعیتهای با درجه خلوص بالای سلولهای اسپرماتوژنیک را جهت انجام مطالعات مولکولی و سلولی، جداسازی کرد.