ردیابی عفونت مایکوپلاسما سینوویه با استفاده از روش های کشت و واکنش زنجیره ای پلیمراز در مزارع مرغ مادر استان تهران

مایکوپلاسما سینوویه(MS) یک عامل بیماریزای مهم پرندگان است که قادر به ایجاد بیماری تنفسی، تورم مفصل و سینوویت بوده و خسارت اقتصادی به صنعت ماکیان کشور و بویژه مزارع مرغ مادر وارد مینماید. هدف از این مطالعه ردیابی و جداسازی مایکوپلاسما سینوویه از مزارع مرغ مادر استان تهران، با استفاده از روش های واکنش زنجیره ای پلیمراز و کشت اختصاصی MS بود. تعداد 475 نمونه سوآپ شامل شکاف کامی- حلقی، نای، تخمدان و یا حفره مفصلی از 23 گله مرغ مادر گوشتی استان تهران اخذ گردید. نمونه ها در محیط های اختصاصی PPLO که مکملهای مخصوص جدا سازی MS به آن افزوده شده بود، کشت شدند. DNA باکتری ها با کمک روش فنل و کلرفروم استخراج شدند و آزمون واکنش زنجیره ای پلیمراز بر روی نمونه های استخراج شده و با استفاده از پرایمرهای اختصاصی MS جهت تکثیر یک قطعه 207 جفت بازی در ناحیه 16S rRNA انجام شد. ازتعداد 475 نمونه کشت شده، 146 نمونه پرگنه های مخصوص مایکوپلاسما را نشان دادند که 85 نمونه از آنها بر اساس آزمونهای سرولوژی با استفاده از آنتی سرم و واکنش زنجیره ای پلیمراز اختصاصی، گونه MS تشخیص داده شدند. علاوه بر 85 نمونه MS که در هر دو آزمون کشت و واکنش زنجیره ای پلیمراز شناسایی شدند، 37 نمونه دیگر MS که در محیط PPLO رشد نکرده بودند، در آزمون واکنش زنجیره ای پلیمراز ردیابی شدند. در مجموع محصول PCR در 122 نمونه بصورت باند 207 جفت بازی اختصاصی MS در ژل الکترو فورز مشاهده گردید و همچنین تعداد 292 نمونه در هر دو آزمون کشت و واکنش زنجیره ای پلیمراز منفی بودند. از 475 نمونه بررسی شده، 122 نمونه مثبت MS (7/25%) متعلق به 7 مزرعه مرغ مادر (4/30%) بودند. نتایج این مطالعه عفونت MS در گله های مرغ مادر استان تهران را با اطمینان تایید نمود. نتایج نشان داد که واکنش زنجیره ای پلیمراز یک روش موثر و مطمئن جهت جایگزینی کشت بوده که در ردیابی و شناسایی گله های مرغ مادر آلوده با کمترین زمان ممکن میتواند مورد استفاده قرار گیرد.