Expression and Purification of Functionally Active Recombinant Human Alpha 1-Antitrypsin in Methylotrophic Yeast Pichia Pastoris
Author(s):
Abstract:
Human alpha 1-antitrypsin (AAT) cDNA was obtained from HepG2 cell lines. After PCR and construction of expression vector pPICZα-AAT, human AAT was expressed in the yeast Pichia pastoris (P.pastoris) in a secretary manner and under the control of inducible alcohol oxidase 1 (AOX1) promoter. The amount of AAT protein in medium was measured as 60 mg/l 72 hr after induction with methanol. Results indicated the presence of protease inhibitory function of the protein against elastase. Purification was done using His-tag affinity chromatography. Due to the different patterns of glycosylation in yeast and human, the recombinant AAT showed different SDS-PAGE patterns compared to that of serum-derived AAT while pI shifted from 4.9 in native AAT compared to 5.2 in recombinant AAT constructed in this study.
Language:
English
Published:
Avicenna Journal of Medical Biotechnology, Volume:3 Issue: 3, Jul-Sep 2011
Page:
127
magiran.com/p902268
دانلود و مطالعه متن این مقاله با یکی از روشهای زیر امکان پذیر است:
اشتراک شخصی
با عضویت و پرداخت آنلاین حق اشتراک یکساله به مبلغ 1,390,000ريال میتوانید 70 عنوان مطلب دانلود کنید!
اشتراک سازمانی
به کتابخانه دانشگاه یا محل کار خود پیشنهاد کنید تا اشتراک سازمانی این پایگاه را برای دسترسی نامحدود همه کاربران به متن مطالب تهیه نمایند!
توجه!
- حق عضویت دریافتی صرف حمایت از نشریات عضو و نگهداری، تکمیل و توسعه مگیران میشود.
- پرداخت حق اشتراک و دانلود مقالات اجازه بازنشر آن در سایر رسانههای چاپی و دیجیتال را به کاربر نمیدهد.
In order to view content subscription is required
Personal subscription
Subscribe magiran.com for 70 € euros via PayPal and download 70 articles during a year.
Organization subscription
Please contact us to subscribe your university or library for unlimited access!