بررسی بازده شیب چگالی در جدا سازی سلول های بنیادی مزانشیمی از نمونه

امروزه سلول های بنیادی مزانشیمی امید های تازه ای را برای درمان بیماری های مختلف به وجود آورده است. اما تعداد کم این سلول ها، تکثیر آن ها را اجتناب ناپذیر کرده است. به نظر می رسد تکثیر در محیط خارج بدن کیفیت این سلول ها را برای پیوند تحت تاثیر قرار می دهد. در تمامی روش های جدا سازی از شیب چگالی فایکل به عنوان کاهش دهنده ی حجم نمونه ی اولیه و حذف کننده RBC استفاده می شود. در این مطالعه بازده شیب چگالی فایکل مورد ارزیابی قرار گرفت.

نمونه های مغز استخوان انسانی بر روی فایکل برده شد و پس از سانتریفوژ، سلول های لایه ی تک هسته ای روی فایکل و لایه ی RBC زیر فایکل کشت داده شد. سپس تعداد و خصوصیات سلول های بنیادی مزانشیمی جداشده از دو لایه با یکدیگر مقایسه گردید.

نتایج کشت نشان داد که لایه ی RBC زیر فایکل حاوی سلول های با مشخصات سلول های بنیادی مزانشیمی بودند. این سلول ها دوکی شکل بوده، از قدرت تکثیر بالا برخوردار بودند. هم چنین دارای پتانسیل تمایزی به رده ی چربی و استخوان می باشند. آنالیز سیتوفلورومتریک نشان داد که این سلول ها برای مارکر هایی سطحی CD73،CD90،CD105 مثبت و برای مارکر هایی CD45،CD34،CD31 منفی بودند. هم چنین این سلول ها 22± 58 درصد از کل سلول های بنیادی مزانشیمی یک نمونه را تشکیل می دادند.

روش شیب چگالی از بازده لازم برای جدا سازی سلول های بنیادی مزانشیمی برخوردار نبوده، بیش از نیمی از کل سلول ها حین سانتریفوژ به زیر فایکل غوطه ور شده و حذف می شوند. در نتیجه روشی جایگزین برای جداسازی مقادیر بیشتری از این سلول ها از نمونه ی مغز استخوان مورد نیاز می باشد.