ارزیابی تغییرات نیکوتین در گیاهان توتون (Nicotiana tabacum L.) جهش یافته با T-DNA

گیاه توتون (Nicotiana tabacum L.)حاوی مقدار زیادی آلکالوئید نیکوتین است که برای سلامتی انسان مضر است. دست ورزی های ژنتیکی از جمله انتقال ژن های مسدود کننده مسیر بیوسنتز نیکوتین، القاء موتاسیون، ایجاد تغییرات سوماکلونال و انتقال T-DNA به منظور القاء تغییرات مناسب ژنتیکی برای کاهش بیان آنزیم های کلیدی مسیر تولید نیکوتین می تواند موجب تغییر در میزان نیکوتین در این گیاه گردد، لذا این تحقیق با هدف بررسی تغییرات نیکوتین در گیاهان توتون جهش یافته با T-DNA طراحی و انجام گرفت.
در مطالعه حاضر گیاهان جهش یافته K4حاوی (T-DNA)، گیاهان حاوی Ri-TDNA، گیاهان باززائی شده از برگ و گیاهان طبیعی روی محیط کشت MSحاوی آنتی بیوتیک کانامایسین تکثیر یافتند. سپس برگ های گیاهان جهش یافته و طبیعی جداگانه خشک و آسیاب شدند. عصاره استخراج شده توسط هگزان از بافت برگ، توسط TLC و GC از نظر کیفی و کمی مورد ارزیابی قرار گرفت.
آنالیز عصاره های حاصله کاهش میزان نیکوتین در گیاه جهش یافته K4 و افزایش آن را در گیاهان باززایی شده و جهش یافته Ri-TDNA نسبت به گیاهان طبیعی مادری نشان دادند.
احتمالا تغییر در میزان نیکوتین در گیاهان جهش یافته و باززائی شده به خاطر فعال سازی ژن های آنزیم های کلیدی مسیر بیوسنتز آلکالوئید نیکوتین در مورد گیاه جهش یافته حاوی Ri-TDNA و بالعکس خاموش شدن و یا کاهش بیان این ژن ها در گیاه جهش یافته K4 (حاوی T-DNA) می باشند.