مطالعه مایکوباکتریوم بویس سویه مورد استفاده در تولید توبرکولین گاوی موسسه رازی

توبرکولین آنتی ژن های پروتئینی تخلیص شده از کشت خالص باسیل توبرکول است که برای تشخیص عفونت های پنهانی به باسیل سل، به افراد مشکوک تزریق می شود.در موسسه رازی که تولید کننده انحصاری توبرکولین گاوی در ایران است از سال 2004 میلادی همگام با سایر نقاط دنیا از مایکوباکتریوم بویس سویه AN5 برای تولید این فرآورده استفاده می شود که این امر ضرورت مطالعات ژنومی این سویه را محرز می نماید. در این پژوهش ابتدا این سویه روی محیط کشت لونشتاین جانسون کشت داده شد. ازکلنی های مشخص طبق روش ون-سولینگن، DNAهای لازم استخراج شد. در بررسی و اثبات این مطلب که نمونه مورد استفاده در موسسه رازی متعلق به کمپلکس مایکوباکتریوم توبرکلوزیس است، با استفاده از آغازگرهای 1- Ins و Ins-2 که نشان دهنده حضور توالی IS6110 می باشد و مختص خانواده کمپلکس مایکوباکتریوم توبرکلوزیس می باشد PCR انجام شد. در بررسی نتایج حاصل از PCRتوالیIS6110 مشاهده باند در ناحیه 245 جفت بازی متعلق بودن نمونه مورد بررسی را به کمپلکس مایکوباکتربوم توبرکلوزیس اثبات نمود. بخشی از DNA استخراج شده، توسط آنزیم های AluI و PvuII هضم و پس از الکتروفورز بر روی کاغذ نایلونی منتقل و با پروب PGRS. هیبریداسیون انجام شد. الکوی های ژنومی DNA حاصل از RFLP با الگوی سویه مورد استفاده در تولید توبرکولین گاوی سایر نقاط دنیا، مقایسه شد.