راه اندازی روش واکنش زنجیره ای پلیمراز برای تشخیص بیماری لوک آمریکایی زنبور عسل

بیماری لوک آمریکایی زنبور عسل یا AFB(American foulbrood) به وسیله باکتری گرم مثبت اسپوردار به نام پنی باسیلوس لاروا تحت گونه لاروا ایجاد می شود. روش سنتی تشخیص آزمایشگاهی بر اساس تکنیک های کشت، زمان و کار آزمایشگاهی زیادی را مصرف می نماید. در این مطالعه با استفاده از باکتری سویه استاندارد و پرایمرهای اختصاصی، واکنش زنجیره ای پلیمراز راه اندازی شد و محصول آن روی ژل آگارز 8/0 درصد الکتروفورز گردید. پرایمرها از ژن 16S rRNA انتخاب شده بودند و یک قطعه bp 700 را تکثیر می دادند. حساسیت واکنش زنجیره ای پلیمراز برای باکتری، اسپور، عسل و لارو آلوده شده به صورت تجربی، تعیین گردید. کمترین مقدار باکتری و اسپور که قادر به شناسایی بودیم به ترتیب 28، 31، 330 و 234 cfu/ml تعیین شد. این روش برای شناسایی پنی باسیلوس لاروا لاروا در نمونه های عسل، لاروهای مشکوک به بیماری و یا روی کلنی های رشد کرده روی محیط کشت بدون نیاز به آزمایشات بیوشیمیایی می تواند به کار رود.