بررسی میزان رشد و تولید کپسول هموفیلوس آنفلوانزا در محیطهای مختلف

در این مطالعه، به منظور تعیین میزان رشد هفت ایزوله از هموفیلوس آنفلوانزا تایپ (BHIB)، از چهار محیط کشت مختلف استفاده شد تا بهترین محیط از نظر بالاترین بازده رشد باکتریایی انتخاب گردد. برای این کار چهار محیط براث بکار برده شدند که شامل انفوزیون مغز-قلب (BHIB)، تریپتیکاز سوی (TSB)، مولز هینتون (MHB) و گونوکوکسی (GCB) که به همه آتها دو فاکتور رشد هموگلوبین و ایزوویتالکس، هر کدام بمیزان 1٪ اضافه شده بود. میزان رشد هر ایزوله در هر یک از محیطها توسط اندازه گیری CFU/ml انجام پذیرفت. چهار ایزوله از هفت ایزوله مورد مطالعه بالاترین رشد را در BHIB و دیگر سوشها این میزان را در TSB از خود نشان دادند که به مقدار بیش از CFU/ml 1010 طی 18 ساعت رسید. در مرحله بعد، با هدف انتخاب بهترین ایزوله با بالاترین میزان آنتی ژن پلی ساکارید کپسولی (CPS-b)، مقدار این آنتی ژن در هر ایزوله، که از ترکیبی بنام پلی ریبوفسفات (PRP) ساخته شده، به دو روش مختلف اندازه گیری شد: الایزای ساندویچ غیر مستقیم و بیال. لازم به ذکر است که آنتی بادی های استفاده شده در این نوع الایزا توسط تزریق واکسن Hib به خرگوش و رت تهیه شد. بالاترین میزان PRP کپسولی متعلق به یکی ازسوش ها با نام گذاری (Hib5s) بود که به میزان mg/lit 321 از این آنتی ژن مهم را تولید کرده بود که متعاقبا می توان از این سوش در واکسن سازی بهره جست.