تشخیص مولکولی اسپورهای پنی باسیلوس لاروا لاروا در نوزادان بیمار زنبور عسل

بیماری لوک آمریکایی یک بیماری باکتریایی است که اختصاص به نوزادان زنبور عسل دارد و عامل بیماری باکتری پنی باسیلوس لاروا لاروا نام دارد. تشخیص آزمایشگاهی سریع این بیماری به دامپزشکان و زنبورداران کمک می کند که بیماری را در مراحل اولیه شناسایی و قبل از آنکه میلیارد ها اسپور در سلولهای حاوی لاروهای تلف شده تولید شود بیماری را کنترل و با آن مبارزه نمایند. روش هایی مانند کشت باکتریایی و تست های بیوشیمیایی بسیار زمان بر و پر هزینه بوده و گاهی با نتایج کاذب همراه هستند. در این مطالعه با استفاده از پرایمر های اختصاصی و روش PCR، اسپور های موجود در نمونه های لارو ردیابی شده اند. بدین منظور تعداد 54 نمونه لارو که از زنبورستانهای واقع در استانهای مختلف به بخش تشخیص و تحقیق بیماری های زنبور عسل موسسه رازی ارسال شده بود مورد بررسی قرار گرفت. نمونه های لارو مشکوک به بیماری لوک آمریکایی در یک میلی لیتر آب مقطر استریل به خوبی هموژن و سپس سانتریفوژ گردید. محلول رویی را برداشته و درg 6000 به مدت 30 دقیقه سانتریفوژ و رسوب که حاوی اسپور می باشد جهت استخراج DNA مورد استفا ده قرارگرفت. DNA استخراج شده با استفاده از پرایمر های اختصاصی جهت PCR به کار گرفته شد. سپس محصول PCR استخراج شده روی ژل آگارز 8/0 % الکتروفورز گردید. نتایج حاصله از انجامPCR نشان داد که 5 نمونه از 54 نمونه لارو مثبت می باشد.