بررسی بیان ایزوفرم های پروتئینی ژنChromosome (RBMY) RNA-Binding Motif Gene on Y در بافت بیضه و لاین سلولی سرطانی مشتق از سلول های زایا (NT2)

ژن Chromosome (RBMY) RNA-Binding Motif Gene on Y یک پروتئین هسته ای با بیان اختصاصی در سلول های زایشی می باشد و به عنوان یکی از فاکتورهای مهم در فرآیند تولید اسپرم شناخته می شود. همچنین نقص در این ژن ارتباط بالایی با عقیمی مردان نشان داده است. با وجود اینکه عملکردهای مختلفی برای این پروتئین در طول فرآیند تولید اسپرم پیش بینی شده، تا به حال مطالعه ای برای آنالیز بیان ایزوفرم های این پروتئین در سلول های مختلف بافت بیضه انجام نگرفته است. در این مطالعه الگوی بیان ایزوفرم های این پروتئین در بافت بیضه و نیز لاین سلولی NT2 که یک لاین سلولی مشتق شده از سلول زاینده سرطانی می باشد، مورد بررسی و مقایسه قرار گرفت.
برای این منظور، توالی کد کننده کامل و نیز قسمتی از این توالی کلون و پروتئین نوترکیب آن در باکتری اشرشیاکلی تولید شد. با استفاده از پروتئین نوترکیب حاصل از بخشی از این ژن به عنوان آنتی ژن و تزریق آن به خرگوش آنتی بادی اختصاصی بدست آمد. در گام بعدی آزمایش های وسترن بلات و ایمونوهیستوشیمی برای شناسایی و آنالیز بیان RBMY و ایزوفرم های آن صورت پذیرفت. طبق نتایج بدست آمده تنها بلندترین ایزوفرم RBMY در لاین سلولی NT2 شناسایی شد، در حالیکه در بافت بیضه بیان هر سه ایزوفرم مشاهده گردید.
بحث: نتایج نشان می دهد که احتمال برش جایگزین (alternative splicing) اختصاصی در سلول های مختلف بیضه وجود دارد که در نتیجه، عملکردهای مختلفی از این پروتئین در مراحل تولید اسپرم حاصل می گردد. نتایج این مطالعه و نیز مطالعات بیشتر برای آنالیز بیان ایزوفرم های این پروتئین و عملکرد اختصاصی ایزوفرم ها می تواند به درک بالاتری از عملکرد این ژن و نیز دلایل عقیمی مردان بینجامد.