ساخت و ارزیابی یک سازه ی DNA بیان کننده ی پروتئین Core ویروس هپاتیت C متصل به آنتی ژن S ویروس هپاتیت B به عنوان یک کاندید واکسن

با وجود این که ویروس هپاتیت C (Hepatitis C virus یا HCV) یکی از عوامل مهم ایجاد کننده ی بیماری های مزمن کبدی می باشد، هنوز واکسن مناسبی برای آن تهیه نشده است. هدف از این مطالعه ساخت یک سازه ی بیان کننده ی توالیCore (aa: 1-122) ویروس هپاتیت C متصل به آنتی ژن s ویروس هپاتیت B (HBsAg یا Hepatitis B surface antigen) و تایید بیان آن در سلول های یوکاریوتی می باشد.
در ابتدا توالی Core این ویروس با استفاده از پرایمرهای دارای جایگاه برش آنزیمی BamHI/EcoRV از روی وکتور pIVEX2.4a حاوی این ژن تکثیر شد و در وکتور pCDNA3.1 حاوی HBsAg خطی شده با آنزیم های مذکور کلون شد. ارزیابی و تایید ساختار نوترکیب به وسیله ی برش آنزیم های محدودکننده ودر نهایت تعیین توالی صورت گرفت. پلاسمید ساخته شده ی نهایی (pCHCORE) در رده ی سلولی HEK293T ترانسفکت شد و ارزیابی نهایی بیان توسط تست وسترن بلات بر روی سلول های HEK293T ترانسفکت شده به وسیله ی آنتی بادی پلی کلونال آنتی HBsAg موشی صورت گرفت.
توالی ژن Core (1-122) ویروس هپاتیت C با موفقیت تکثیر گردید و نتایج ارزیابی برش آنزیمی و تعیین توالی تاییدکننده ی صحت ساختار نوترکیب pCHCORE و کلونینگ انجام شده، بود. نتیجه ی وسترن بلات بیانگر انتقال موفق پلاسمید و بیان ژن هدف در سلول های یوکاریوتی بود.
با توجه به ساخت و بیان موفقیت آمیز ساختار HBS-core در سلول های یوکاریوتی و به دلیل احتمال افزایش پاسخ های ایمنی توسط آنتی ژن HBS به صورت فیوژن با پروتئین Core (بر اساس تحقیقات قبلی)، سازه ی بیانی حاوی ژن Core ویروس هپاتیت C متصل شده به این آنتی ژن، ممکن است باعث القای بیشتر پاسخ های ایمنی علیه پروتئین Core شود و بتواند به عنوان واکسن موثر به منظور کنترل عفونت HCV به کار رود.