تشخیص همزمان سه باکتری سالمونلا تیفی، باسیلوس آنتراسیس و یرسینیا پستیس با راه اندازی مولتی پلکس پی سی آر

سه باکتری سالمونلا تیفی، باسیلوس آنتراسیس و یرسینیا پستیس از پاتوژن های واقعی برای انسان محسوب می شوند و تشخیص به موقع و زود هنگام آن ها حائز اهمیت بسیاری است. سالمونلا تیفی باعث بیماری حصبه، باسیلوس آنتراسیس باعث سیاه زخم و یرسینیا پستیس سبب بیماری طاعون می شود. این سه نوع باکتری به عنوان عوامل بیولوژیک نظامی نیز استفاده می گردد. روش های کلاسیک تشخیص این باکتری ها طولانی و پیچیده است. مطالعه ی حاضر ارایه ی یک روش تشخیصی مولکولی جدید و سریع برای تشخیص همزمان این سه باکتری در یک واکنش مولتی پلکس پی سی آر می باشد.

واکنش زنجیره ایی پلی مراز Polymerase Chain Reaction، PCR)) برروی ژن های ویرولانس invA،hp سالمونلا تیفی،Pa،chr باسیلوس آنتراسیس و pla یرسینیا پستیس به صورت یونی پلکس و مولتی پلکس پی سی آر طراحی و انجام شد. DNAژنومی از سایر باکتری ها جهت بررسی ویژگی پرایمر و آزمایش PCR استفاده شد. جهت بررسی حساسیت واکنش از دو روش شمارش کلنی و رقت ژنوم استفاده شد.

بررسی این روش با سویه های استاندارد مشخص نمود که پرایمرها اختصاصی است و محصولات با اندازه ی مورد نظر تولید گردید. بررسی حساسیت روش نشان داد که این روش قادر است 1 تا10 کپی ژنوم و یا 1 تا 10 واحد کلنی برای هر کدام از این باکتری ها به طور اختصاصی تشخیص دهد. برای تایید محصولات ایجاد شده در PCR تمام قطعات به جز محصول bp1083 باسیل آنتراکس تعیین ترادف شدند و آنتراکس با پرایمر 125 برش آنزیمی تایید گردید.

براساس این مطالعه روش طراحی شده ابزاری دقیق، سریع و کم هزینه برای جستجو و تشخیص این باکتری ها از سایر باکتری های هم خانواده و تشخیص سریع این سه عامل در نمونه های مختلف و جستجو و تشخیص این باکتری ها را در موارد بیوتروریستی فراهم می کند.