جدا سازی و خالص سازی یک باکتریوسین مقاوم به اشعه ی ماورای بنفش از سویه یDSH20 انتروکوک فاسیوم دارای اثر ضد باکتری لیستریا منوسیتوژنز

علاوه بر مطرح بودن باکتریوسین ها به عنوان جایگزین آنتی بیوتیک های مرسوم، کاربرد رایج آن ها به عنوان ماده ی نگه دارنده و محافظ در صنایع غذایی است. هدف از این مطالعه، جدا سازی و خالص سازی باکتریوسین های مقاوم به اشعه ی ماورای بنفش (Ultraviolet یا UV) از سویه های انتروکوک بود که بر ضد باکتری لیستریا منوسیتوژنز فعال باشند.
سویه های باکتری انتروکوک از نمونه های مختلف بالینی جدا سازی و شناسایی شدند و تولید باکتریوسین در آن ها علیه سویه های باکتری لیستریا منوسیتوژنز مورد بررسی قرار گرفت. یک ایزوله ی باکتری انتروکوک، که دارای تولید قابل ملاحظه ی باکتریوسین بر علیه همگی سویه های لیستریا منوسیتوژنز مورد مطالعه بود، به روش فنوتیپی و بیوشیمیایی و نیز روش ملکولی 16SrRNA مورد شناسایی قرار گرفت و در سایت NCBI (National Center for Biotechnology Information) ثبت گردید. در مرحله ی بعد، این باکتریوسین خالص سازی شد و اثرات آنزیم های مختلف پروتئولیتیک و نیز تیمارهای pH، حرارت و اشعه ی ماورای بنفش بر روی آن مورد بررسی قرار گرفت؛ وزن ملکولی آن نیز به روش SDS-PAGE مشخص گردید.
از 70 سویه ی مختلف انتروکوک جدا سازی شده، 5 ایزوله ی انتروکوک دارای اثر مهاری بر علیه سویه های لیستریا منوسیتوژنز بود که از این میان، یک ایزوله بر ضد هر چهار سویه ی لیستریا منوسیتوژنز مورد مطالعه، دارای اثر مهاری بود. بر اساس نتایج تعیین توالی 16SrRNA این ایزوله، مشخص شد که این باکتری، یک سویه از انتروکوک فاسیوم بود که به نام DSH20 و با شماره ی دسترسی JX567733.1در سایت NCBI به ثبت رسید. آنزیم های پروتئولیتیک استفاده شده باعث از بین رفتن فعالیت ضدمیکروبی باکتریوسین گردید که تاییدی بر پروتئینی بودن این ترکیب بود. باکتریوسین تولیدی به اثر درجه ی حرارت بالا، تغییرات pH و اشعه ی ماورای بنفش مقاوم بود. وزن ملکولی باکتریوسین جدا سازی شده به روش SDS-PAGE در حدود 35 کیلودالتون تخمین زده شد.
خصوصیات بیوشیمیایی باکتریوسین مورد مطالعه از قبیل پایداری حرارتی، مقاومت به اشعه ی ماورای بنفش و pH بسیار قابل توجه بود. توانایی بالقوه ی این باکتریوسین، آن را به عنوان ترکیب ضد میکروبی جایگزین علیه لیستریا منوسیتوژنز و نیز نگه دارنده ی غذاهای تخمیری مطرح می سازد.