شناسایی آلودگی مایکوپلاسما سالیواریوم در کشت های سلولی با استفاده از روش PCR

مایکوپلاسما سالیواریوم یکی از گونه های مایکوپلاسمای اصلی آلوده کننده کشت های سلولی محسوب می شود و می تواند آثار نامطلوبی را روی کشت های سلولی ایجاد کند؛ در نتیجه شناسایی این آلودگی و سرعت تشخیص آن، در کنترل و پیشگیری از این موضوع اهمیت دارد. هدف از این مطالعه شناسایی آلودگی مایکوپلاسما سالیواریوم در کشت های سلولی با استفاده از روش واکنش زنجیره پلیمرازی (PCR) بود.

به منظور راه اندازی PCR از سویه استاندارد مایکوپلاسما سالیواریوم و آغازگرهای اختصاصی این گونه براساس تکثیر قطعه ای از ژن 16SrRNA استفاده شد و در ادامه حساسیت و ویژگی این آزمون تعیین شد. نمونه های مورد بررسی پس از استخراج DNA، از نظر آلودگی به جنس مایکوپلاسما و گونه سالیواریوم مورد آزمایش PCR قرار گرفتند.

در این مطالعه تعداد 62 نمونه از کشت های سلولی ارسالی به آزمایشگاه مرجع مایکوپلاسما در موسسه رازی مورد بررسی قرار گرفتند که از این تعداد 42 (75/67 درصد) نمونه از نظر آلودگی به جنس مایکوپلاسما و از این تعداد 15 (72/35 درصد) نمونه با ایجاد باند در 434 جفت باز از نظر آلودگی به گونه مایکوپلاسما سالیواریوم مثبت بودند.

با توجه به بالا بودن درصد آلودگی کشت های سلولی به مایکوپلاسما سالیواریوم، رعایت شرایط آسپتیک توسط پرسنل آزمایشگاه در مراحل آماده سازی و کار با کشت های سلولی توصیه می شود. ضمنا با بهره گیری از آغازگرهای مناسب و اختصاصی امکان شناسایی و تشخیص آلودگی به مایکوپلاسما سالیواریوم در آزمایشگاه های کشت سلولی، در کمتر از یک روز با استفاده از روش PCR امکان پذیر است.