نقش دو پروتئین FhaB1 و FhaB2 وابسته به سیستم ترشحی دو جزئی در چسبندگی اسنیتوباکتر بومانی ATCC19606 به سلول اپیتلیال انسانی

اسنیتوباکتر بومانی توانایی عجیبی برای کلونیزاسیون بر سطوح مختلف را داراست و چسبندگی روی سطوح به عنوان یک عامل بیماری زایی و اولین گام در انجام فرآیند کلونیزاسیون مطرح است. پروتئین های وابسته به خانواده سیستم ترشحی دوجزئی می تواند در چسبندگی باکتری نقش داشته باشد. هدف از انجام این تحقیق، شناسایی، مطالعه و بررسی نقش پروتئین های این خانواده در چسبندگی اسنیتوباکتر بومانی به سلول اپیتلیال انسانی است.
هومولوگ ژن های کد کننده پروتئین فیلامنت- هماگلوتینین وابسته به سیستم ترشحی دو جزئی در ژنوم اسنیتوباکتر بومانی با کمک نرم افزارهای بیوانفورماتیک در بانک ژنی تجزیه و تحلیل و سپس آغازگرها طراحی شد. بنابراین سازه های مورد نظر در ناقلpET22b سنتز و به سلول(BL21(DE3 ترانسفورم و سلول های تراریخت شده FhaB1، FhaB2 نامگذاری شدند. میزان بیان پروتئین های نوترکیب بر سطح غشای سلول مطالعه و در نهایت میزان چسبندگی و توانایی برای تشکیل بیوفیلم در سلول های نوترکیب، اسنیتوباکتر بومانی و سلول اشریشیا کلی(BL21(DE3 مقایسه شد.
بررسی های بیوانفورماتیک نشان داد که این باکتری توانایی تولید دو نوع اگزوپروتئین FhaB1، FhaB2 را داراست. بیان پروتئین های نوترکیب بر سطح خارجی سلول های تراریخت شده، با آزمایش های وسترن بلات و الایزای سلول کامل تایید شد. آزمایش ها نشان داد که این سلول های نوترکیب و اسنیتوباکتر بومانی نسبت به سلول اشریشیا کلی BL21(DE3) توانایی بالاتری برای تشکیل بیوفیلم دارد. همچنین سلول های FhaB1، FhaB2 و اسنیتوباکتر بومانی نسبت به اشریشیا کلی BL21(DE3) به میزان بیشتری به سطح سلول های اپیتلیال ریه انسانی اتصال می یابند.
سیستم ترشحی دو جزئی در اسنیتوباکتر بومانی یکی از عوامل چسبندگی و کلونیزاسیون بوده و از جمله عوامل بیماری زایی باکتری است.