کلونینگ ژن اتولیزین ماینور استرپتوکوکوس پنومونیه

امروزه افزایش سویه های مقاوم به آنتی بیوتیک و ناکارآمد بودن واکسن های موجود برای پیشگیری از عفونت های پنوموکوکی ضرورت بررسی آنتی ژن های جدید پروتئینی را مشخص می کند. به نظر می رسد اتولیزین ماینور استرپتوکوکوس پنومونیه دارای خواص آنتی ژنیک می باشد. در این مطالعه برای اولین بار ژن آن کلون گردید.

پس از استخراج ژنوم سویه استاندارد استرپتوکوکوس پنومونیه (ATCC 49619) آغازگرهای اختصاصی به منظور تکثیر ژن اتولیزین ماینور با روش PCR طراحی شدند. قطعه ژن تکثیر شده پس از تخلیص به درون وکتورpET21a الحاق و با شوک حرارتی به درون سلول مستعد باکتریایی منتقل شد. وجود ژن در وکتور نوترکیب و عدم بروز جهش در آن با روش های هضم آنزیمی و تعیین توالی مورد بررسی قرار گرفت. این ژن در نهایت به روش بیوانفورماتیک مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت.

قطعه ژن اتولیزین ماینور با موفقیت کلون شد و نتایج هضم آنزیمی نشان دهنده جداسازی کامل این ژن از پلاسمید بود. بررسی های بیوانفورماتیک نشان داد که این ژن فاقد سیگنال پپتید بوده و پروتئینی به وزن ملکولی 44/36 کیلودالتون دارای 318 اسیدآمینه را کد می کند.

معرفی آنتی ژن های جدید نظیر اتولیزین ماینور و تعیین ویژگی های آنها مسیرهای بیش تری را در جهت پیش گیری و کنترل عفونت-های ناشی از استرپتوکوکوس پنومونیه باز خواهد کرد.