بررسی بیان ژن Tsga10 در فرایند تمایز سلول های بنیادی جنینی موشی به سلول های ژرمینال در محیط آزمایشگاهی

تولید سلول های ژرمینال در محیط آزمایشگاهی می تواند نوید دهنده درمان تعدادی از موارد ناباروری مردان باشد. مطالعه حاضر ضمن بررسی فرایند تمایز سلول های بنیادی جنینی موش به سلول های ژرمینال، بیان ژن (Testis specific 10 (Tsga10 را نیز برای اولین بار در این فرایند مورد بررسی قرار داده است.
این مطالعه یک مطالعه آزمایشگاهی (In vitro) است که در گروه ژنتیک پزشکی دانشگاه علوم پزشکی تهران از بهمن 1390 تا اسفند 1391 انجام شده است. سلول های بنیادی جنینی موشی توسط رتینوییک اسید (Retinoic acid، RA) به سمت سلول های ژرمینال القا شدند. در نمونه سلول های در حال تمایز روزهای هفت، 12 و 25 بیان سه گروه از ژن های Pre-meiotic، Meiotic و Post-meiotic با استفاده از(Reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR بررسی شد. برای بررسی بیان ژن Tsga10 به عنوان یک ژن اختصاصی اسپرماتوژنز، Real-time RT-PCR انجام گرفت و نتایج تفسیر گردید. حضور پروتئین TSGA10 در سلول های تمایز یافته با وسترن بلاتینگ و ایمونوسایتوشیمی (Immunocytochemistry) تایید شد.
در مراحل اولیه روند تمایز (روز 12) میزان نسبی بیان Tsga10 به 0/32 مقدار پایه آن در سلول های غیر تمایز یافته کاهش یافت. پس از بیان ژن های Post-meiotic (روز 25) میزان نسبی بیان Tsga10 به مقدار 2/2 افزایش یافت. همچنین میزان بیان نسبی Tsga10 در بیضه موش پنج، 10 و 15 روزه به ترتیب 125، 150 و 170 بود. این میزان در بیضه موش بالغ برابر 1650 برآورد شد.
در طی فرایند تمایز سلول های بنیادی جنینی، بیان Tsga10 پس از بیان ژن های Post-meiotic نسبت به مرحله Meiotic حدود 6/6 برابر افزایش داشت. افزایش بیان Tsga10 در طی عبور از مرحله Meiotic به Post-meiotic، نقش این ژن و محصول پروتئین آن را در مراحل تکامل سلول های ژرمینال نشان می دهد.