تهیه آنتی بادی نوترکیب scFv بر ضد پروتئین سطحی P30 توکسوپلاسما گوندی

توکسوپلاسما گوندی (Toxoplasma gondii)، انگل داخل سلولی اجباری با شیوع گسترده می باشد که قادر است همه میزبانان خونگرم شامل انسان و حیوانات اهلی را آلوده کند. بیشتر موارد آلودگی در انسان بعد از خوردن گوشت خام یا نیم پز آلوده به کیست های بافتی اتفاق می افتد. بنابراین، روش های گوناگونی برای شناسایی این انگل در مواد غذایی آلوده به کار برده شده است. آنتی بادی های نوترکیب نسل جدیدی از آنتی بادی های مونوکلونال می باشند که اغلب توسط فن آوری نمایش بر روی سطح فاژ از لیبراری های فاژی ایمن یا غیر ایمن علیه آنتی ژن مورد نظر جدا می گردند و از آن ها جهت تشخیص تعداد زیادی از آنتی ژن ها و همچنین امور درمانی استفاده می شود. هدف از انجام این تحقیق، جداسازی آنتی بادی های مونوکلونال نوترکیب علیه این انگل مهم بود.
آنتی ژن سطحی توکسوپلاسما گوندی خالص شده P30 روی سطح ایمونوتیوب ها پوشانده شد تا به عنوان یک هدف برای انتخاب آنتی بادی هایی از لیبراری های فاژی تاملینسون I و J نوع scFv استفاده شود. کلون های حامل آنتی بادی های اختصاصی توسط سه مرحله اتصال، جداسازی و تکثیر جدا شد. آنتی بادی های scFv انتخاب شده برای شناخت آنتی ژن فوق توسط آزمایش های ELISA (Enzyme-linked immunosorbent assay)، Dot blot و Western blot مورد سنجش قرار گرفت.
آنتی بادی های نوترکیبی که قادر به شناخت آنتی ژن P30 با میل ترکیبی بالا بودند، جدا شدند و اختصاصی بودن آن ها تایید گردید.
آنتی بادی های تک زنجیره ای محلول جدا شده، گزینه های مناسبی برای استفاده در کیت های تشخیصی جهت شناسایی انگل توکسوپلاسما گوندی در نمونه های آلوده می باشند.