آغازگرهای اختصای مبتنی بر واکنش زنجیره ای پلیمراز برای ردیابی Picoa lefebvrei در ریشه های Carex stenophylla

گونه های Picoa، آرایه های آسکومیست زیرزمینی می باشند که در نواحی نیمه خشک شمال آفریقا، غرب آسیا، جنوب اروپا و کشورهای خاورمیانه از جمله ایران یافت می شود. گونه های این جنس با ریشه گیاهان علفی یک ساله و چند ساله از جنس Helianthemum شامل:H. ledifolium،H. salicifolium var. salicifolium ، H. nummularium و H. squamatum تشکیل قارچ-ریشه می دهند. در ایران، رابطه قارچ-ریشه بین دنبل های بیابانی و گیاهان تیره جگنیان به طور کامل بررسی نشده است. در این مطالعه، ریشه های Wahlenb Carex stenophylla از مراتع مختلف جمع آوری شد که بررسی های مزرعه ای و آناتومیکی رابطه قارچ-ریشه خارجی این گونه گیاهی با دنبل بیابانی P. lefebvrei را مشخص کرد. میسلیوم های خارجی در اطراف تمام ریشه های تشکیل دهنده قارچ-ریشه مشاهده شدند. نواحی یگانه توالی های جداکننده نسخه برداری شده داخلی 1، 2 و ژن 8/5 اس دی. ان. ای. ریبوزومی گونه قارچی در ریشه گیاهان با روش واکنش زنجیره ای پلیمراز تو در تو و استفاده از آغازگرهای عمومی ITS1/ITS4 و آغازگرهای اختصاصی طراحی شدهFLE 5 GTA CCT TAC CTG TTG CTT CCG TG ،) (RLE 5 ATC CCT ACC TGA GCC GAG GTC AA تکثیر شد. با استفاده از این روش، محصولی به اندازه 500 جفت باز از ریشه گیاهان همزیست به دست آمد که با نمونه های P. lefebvrei ثبت شده در بانک ژن صد در صد شباهت داشتند. این موضوع ثابت کرد که محصول واکنش زنجیره ای پلیمراز تکثیر شده با آغازگرهای اختصاصی، متعلق به گونه P. lefebvrei بوده و به این ترتیب ارتباط میکوریزی این گونه قارچی با گونه گیاهی C. stenophylla به اثبات رسید.