تهیه کشت سلولی اولیه زنبور عسل (.Apis mellifera L) به روش های هضم آنزیمی و نشاکاری بافت های ریز شده

در این تحقیق به منظور تهیه کشت سلولی اولیه زنبور عسل، نمونه هایی از مرحله لاروی و شفیرگی زنبور عسل تهیه و بر طبق دستورالعمل های استاندارد آماده گردیدند. جهت تهیه کشت اولیه از روش های هضم آنزیمی کوتاه مدت (سه مرحله 10 دقیقه ای)، هضم آنزیمی طولانی مدت (18 ساعته) و روش نشاکاری بافت های ریز شده استفاده گردید. جهت رشد سلول های بدست آمده در روش های مختلف، از محیط کشت Grac''e غنی شده با سرم جنین گاو (FBS) به مقدار 15% در درجه حرارت
oC 28 استفاده گردید. سلول های بدست آمده در روش های مختلف، از نظر تعداد و میزان رشد سلول های زنده وضعیت مناسبی داشته و بعد از 5-2 هفته به سطح پوششی کامل رسیدند و از آن ها چندین پاساژ متوالی تهیه گردید. در روش هضم آنزیمی بهترین نتیجه، از روش تریپسینه کردن طولانی مدت مرحله شفیرگی بدست آمد. نتایج روش نشاکاری بافت های ریز شده در هر دو مرحله لاروی و شفیرگی مشابه و آن ها نیز از نظر تعداد و میزان رشد سلول های زنده وضعیت مناسبی داشتند.