شناسایی و جداسازی اسیدلاکتیک باکتری ها از شیر مادر به روش مولکولی

شیر مادر به عنوان تنها منبع تغذیه در ماه های اول پس از تولد، می تواند عامل مهمی در و توسعه میکروارگانیسم های موجود در روده نوزاد باشد. بنا به اهمیت باکتری های اسیدلاکتیک به خصوص لاکتوباسیل ها در سلامت انسان، شناسایی مولکولی این باکتری ها می تواند گامی موثر در به کارگیری آن ها در محصولات فرا ویژه باشد. هدف از این تحقیق، تشخیص و شناسایی سویه های لاکتوباسیلوس موجود در شیر مادر است. در این مطالعه پس از غنی سازی نمونه های شیر در محیط ام آر اس براث، جداسازی و خالص سازی سویه ها در همان محیط کشت صورت گرفت. پس از بررسی های میکروسکوپی با آزمون های بیوشیمیایی ازجمله تخمیر قند، تولید گاز و آزمون آنتی بیوگرام ، خصوصیات اولیه باکتری ها تعیین شد.در نهایت شناسایی مولکولی بر اساس توالی های16sRNA و سپس انگشت نگاری ژنومی از طریق REP-PCR انجام شد. باسیل ها و کوکسی های گرم مثبت و کاتالاز منفی شناسایی و بر اساس نمونه و مورفولوژی کلنی کدگذاری گردیدند.BLASTموردبررسی قرار در مرحله بعد باکتری هایی که در آزمون های آنتی بیوگرام، تخمیر قند و تولید گاز تفاوت هایی از خود نشان داده بودند برای شناسایی مولکولی انتخاب شدند. در نهایت محصولاتPCR توالی یابی شدند و توالی ها در نرم افزار BLAST موردبررسی قرار گرفتند.نتایج توالی یابی با استفاده از سرور EZ TAXONآنالیز شد. نتایج نشان داد که سویه های جداشده از نوع پدیوکوکوس لولی، لاکتوباسیلوس رامنوسوس و لاکتوباسیلوس فرمنتوم بودند .شیر مادران می تواند به عنوان منبعی از اسیدلاکتیک باکتری های پروبیوتیکی مورد توجه باشد که ممکن است نقش مهمی در پیشگیری ابتلا نوزادان به بیماری های عفونی داشته باشد . از طرفی تحقیق حاضر نشان دهنده کارایی انگشت نگاری ژنومی REP-PCR با کمک نشانگر 5GTG در بررسی روابط فیلوژنیک و تنوع باکتری ها می باشد .