تولید آنتی بادی پلی کلونال علیه پروتئین حرکتی ویروس پیچیدگی زرد برگ گوجه فرنگی و بررسی کارآیی آن در ردیابی ویروس

بیماری ویروسی پیچیدگی زرد برگ گوجه فرنگی از مهم ترین بیماری های ویروسی گوجه فرنگی (Solanum lycopersicum L.) در مناطق گرمسیری و نیمه گرمسیری و گلخانه های مناطق معتدل جهان به شمار می رود. به منظور تولید آنتی بادی علیه ویروس عامل بیماری برای استفاده در ردیابی و معرفی کیت تشخیص بیماری، پروتئین حرکتی همسانه سازی شده ویروس در ناقل بیانی pET26(b)+، از سویه BL21(DE3) باکتری Escherichia coli بیان شد و پروتئین نوترکیب استخراج و به خرگوش تزریق شد. آنتی سرم تهیه شده، به منظور بررسی کارآیی در ردیابی پروتئین بیان شده در باکتری و تشخیص ویروس در گیاهان آلوده، در آزمون های وسترن بلات و الایزا مورد استفاده قرار گرفت. در آزمون وسترن بلات و رقت 1 به 1500 آنتی سرم، باند 13 کیلودالتونی مربوط به پروتئین حرکتی ویروس را در گیاهان آلوده ردیابی کرد. در آزمون الایزا و رقت 1 به 1000 آنتی سرم، واسرشته کردن پروتئین سبب افزایش جذب نوری در نمونه های گیاهان آلوده شد هرچند این اختلاف از نظر آماری معنی دار نبود. این نتایج نشان داد که آنتی سرم تولید شده علیه پروتئین حرکتی ویروس پیچیدگی زرد برگ گوجه فرنگی برای آزمون وسترن بلات مناسب بوده و جهت استفاده در آزمون الایزا نیاز به تخلیص آنتی بادی دارد.