تولید و ارزیابی رده سلولی اپیتلیالی شکل از بافت باله ماهی آزاد دریای خزر (Salmo trutta caspius)

امروزه کشت سلول ابزار بسیار مفیدی برای پاسخ به بسیاری از سوالات در زمینه ی زیست شناسی محسوب می شود و کاربرد رده های سلولی روز به روز در حال افزایش است. در این مطالعه تولید کشت اولیه و Cell line ماهی آزاد دریای خزر (Salmo trutta caspius) مورد بررسی قرار گرفت و دو روش کشت اولیه Explant و روش جداسازی آنزیمی به کمک آنزیم تریپسین به منظور تولید کشت اولیه استفاده شد. مهاجرت سلول از باله های سینه ای، پشتی، دمی و مخرجی در روش Explant با یکدیگر مقایسه شد. تاثیر مدت زمان های مختلف تماس با تریپسین بر روی سلول ها با یکدیگر مقایسه شد. محیط کشت Leibovitz’s L-15 به همراه %20 FBS و %1 Pen-Strep استفاده شد. به منظور ارزیابی رده تولید شده، از سلول ها کاریوتیپ تهیه شد و در نهایت این سلول ها با کمک DMSO فریز شدند و به دمای C ̊196- منتقل شدند. محاسبات کارایی کشت بافت نشان داد که باله سینه ای با میانگین %31/71 بهترین باله به منظور تولید رده سلولی از این ماهی است. در مقایسه کلی بین روش های کشت اولیه، در روش جداسازی آنزیمی با آنزیم تریپسین نسبت به روش Explant، سلول های زنده بیش تری حاصل شد. عدد کروموزومی سلول ها 80=n2 بود و درصد زنده مانی بعد از گذشت یک ماه در ازت مایع %4/84 بود . با توجه به اینکه این سلول ها تا 22 نوبت پاساژ و انجماد و ذوب متوالی، از قابلیت رشد خوبی برخوردار بوده اند، از آن ها می توان در مطالعات مختلف استفاده کرد. این سلول ها به عنوان اولین رده سلولی Cell Strain) ) از آبزیان تولید شده در کشور در بانک سلول های جانوری مرکز ذخائر ژنتیکی و زیستی ایران (IBRC) با کدهای CS2-1، CS2-2 و CSe و شماره دستیابی 3-IBRC C10190 نگهداری می شود.