تاثیر هارمالین بر بیان ژن Dnmt1 و هیپومتیلاسیون پروموتور ژن P15 در رده سلولی لوسمیک NB4

سابقه و هدف متیلاسیون DNA در ناحیه پروموتر ژن‏های سرکوبگر تومور از جمله P15 ، به عنوان یکی از مهمترین مکانیسم‏های ایجاد بدخیمی های خونی مطرح است .هارمالین یکی از آلکالوئیدهای مشتق شده از گیاه اسپند است که دارای خاصیت آنتی‏پرولیفراتیو بر روی رده های سلولی لوسمیک می‏باشد. در این مقاله تاثیر هارمالین بر کاهش بیان ژنDnmt1 و هیپومتیلاسیون ناحیه پروموتر ژن P15 در رده سلولی NB4 مورد بررسی قرار گرفت.
مواد و روش هادر این مطالعه تجربی با استفاده از روش MTT ، تاثیرات سیتوتوکسیک بر رده سلولی NB4 تا 72 ساعت بررسی شد. جهت بررسی چرخه سلولی پس از تیمار با هارمالین، از روش فلوسیتومتری استفاده شد. وضعیت متیلاسیون پروموتور ژن P15 با استفاده از روش Methylation specific PCR بررسی شد. با استفاده از روش Real-time PCR ، میزان بیان ژن های Dnmt1 و P15 بررسی گردید.
یافته هانتایج نشان داد که داروی هارمالین از غلظت μg/mL 15 به بالا، پس از 48 ساعت به صورت وابسته به دوز و زمان دارای خاصیت آنتی پرولیفراتیو بر روی رده سلولی NB4 می باشد. آنالیز چرخه سلولی نشان دهنده ایست سلول ها در فاز G0G1 است. هارمالین در غلظت μg/mL15 موجب کاهش بیان ژن Dnmt1 ، هیپومتیلاسیون پروموتور ژن P15 و افزایش مجدد بیان ژنP15 در رده سلولی NB4می شود.
نتیجه گیریبا توجه به اثر بخشی داروی هارمالین بر کاهش بیان ژن Dnmt1 و هیپومتیلاسیون پروموتور و افزایش بیان ژن P15 در این رده سلولی، می توان چنین پیشنهاد کرد که این دارو می تواند به عنوان یک راه کار درمانی مناسب به صورت منوتراپی و یا داروی مکمل همراه با دارو های متداول لوسمی پرومیلوسیتیک حاد مورد استفاده قرار گیرد.